Question

动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础，请回答下列有关动物细胞培养的问题：

（1）在培养瓶中进行动物细胞培养时，需两次用到胰蛋白酶，第一次使用的目的是将组织分散成单个细胞，此次的胰蛋白酶也可用__________酶代替。由于动物细胞培养具有__________、__________现象，因此需第二次用该酶处理，然后分瓶培养。在培养过程中，应定期更换培养液，目的是___________________。

（2）目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为__________代以内的细胞，以保持细胞正常的__________核型。

（3）在单克隆抗体制备过程中，将获得______________________________(答出两个特点)的杂交瘤细胞进行______培养和抗体检测以后，再经过多次筛选，可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。

Answer

胶原蛋白 贴壁生长（细胞贴壁） 接触抑制 清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害 10 二倍体 既能产生特异性抗体，又能无限增殖 克隆化

【解析】

1、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
2、单克隆抗体的制备流程：人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，通过培养获得的杂交瘤细胞得到单克隆抗体。

（1）胰蛋白酶和胶原蛋白酶都可以将组织分散成单个细胞，所以胰蛋白酶也可用胶原蛋白酶代替。动物细胞培养具有贴壁生长、接触抑制现象，所以培养过程中还需要用胰蛋白酶处理。在培养过程中，应定期更换培养液，清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。
（2）目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内的细胞，以保持细胞正常的二倍体核型。
（3）在单克隆抗体制备过程中，将获得既能产生特异性抗体，又能无限增殖的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测以后，再经过多次筛选，可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。