Question

下图表示利用现代生物技术培养转基因克隆牛的技术流程，用以生产新冠病毒疫苗，请你完善该流程，并回答问题：

（1）①过程首先要构建_____文库，再利用 PCR 或分子杂交技术获取抗原基因。

（2）下列物质中用于体外重组 DNA 的有_____。

A．限制酶    B．DNA 连接酶    C．解旋酶    D．Taq 酶

（3）如果供体牛1是优质高产奶牛，供体牛2 是优质公牛,则细胞1可以是下列哪种细胞_____。

A．完成体外受精的受精卵

B．供体1提供细胞核，供体牛2 提供细胞质的重组细胞

C．供体2提供细胞核，供体1提供细胞质的重组细胞

D．供体1和2有性杂交的受精卵培养形成的胚胎干细胞

（4）对细胞1除了要进行_____的鉴定之外，还需要对____进行鉴定才能得到的满足生产需求的细胞2。二者都可以采用_________方法；而后者还可以在细胞水平进行鉴定，选择性染色体组成为_____的细胞继续培养。

（5）在对④进行分割时要注意_____，得到多个胚胎后，利用⑤胚胎移植技术使多个受体母牛妊娠，就可以期待多个转基因克隆牛的降生了。

（6）如果供体1和供体2都是雌性，则流程中的③是利用了_____技术。

Answer

cDNA文库 AB A 目的基因的检测和鉴定 性别 分子杂交 XX 内细胞团均等分割 核移植

【解析】

分析图解，该技术中①代表目的基因的获取，②代表基因表达载体构建，③代表体外受精或者核移植，④代表胚胎分割。该转基因克隆牛涉及了多项生物工程技术：如果供体1提供细胞核，供体2提供细胞质，经过核移植技术形成重组细胞，并发育形成早期胚胎，再胚胎移植到受体子宫发育成小牛，称为克隆牛；如果优良公牛和优质高产奶牛配种形成受精卵，并发育成早期胚胎，通过胚胎移植到受体子宫发育成小牛，属于有性生殖。

（1）根据图示，①过程是利用新冠病毒的RNA逆转录获得抗原基因，因为该方法只构建了生物部分基因序列的文库，因此属于cDNA文库。

（2）体外DNA重组需要用“分子手术刀”限制性核酸内切酶，“分子缝合针”DNA连接酶，故选AB。

（3）③过程为优质公牛和优质高产奶牛配种形成受精卵，通过培养筛选并发育成早期胚胎，通过胚胎移植到受体子宫发育成小牛，属有性生殖，故选A。

（4）细胞 1作为目的基因的受体细胞，要对受体细胞中的目的基因进行检测和鉴定，可采用分子杂交技术；为了确保得到雌性的奶牛，往往需要对移植前的胚胎进行性别鉴定，检测依据的原理是DNA分子杂交，两者都可以采用分子杂交方法检测。由于雄性的性染色体组成为XY，而雌性的性染色体组成为XX，因此还可以利用显微镜观察胚胎细胞性染色体组成以确定胚胎性别，选择性染色体组成为XX的细胞继续培养，可获得雌性奶牛。

（4）对④囊胚进行胚胎分割，要注意将内细胞团均等进行分割，否则影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。

（5）如果供体1和供体2都是雌性，则一个供体提供细胞核，另一个供体提供卵母细胞的细胞质，经过流程③核移植技术形成重组细胞，并发育形成早期胚胎，通过胚胎移植到受体子宫发育成小牛，称为克隆牛。