下列有关基因工程的叙述中，正确的是（ ）
A. 限制酶都来源于原核生物，只用于切割获取目的基因
B. 基因工程的原理是利用物理或化学因素诱导基因突变
C. 基因工程的基本操作工具是限制酶、DNA连接酶、载体
D. 基因工程在细胞水平对生物体的遗传性状进行定向改造
急性胰腺炎（acute pancreatitis，AP）患者的胰腺组织，由于自身消化、水肿、出血甚至会坏死，所以具有很高的致病率与致死率。以往研究成果发现细胞自噬是引起急性胰腺炎的主要原因。在前期实验中发现AP的细胞中MasⅠ基因表达量异常，故推测该基因表达量的变化可能对AP细胞自噬有影响。为证明这一推测，科研人员做了如下实验。请据此回答：
（1）取小鼠胰腺的组织，剪碎、并用_____处理，使细胞分散以便进行_____代培养。与植物组织培养相比，培养动物细胞的培养基中不需要添加_________等物质，这样可以模拟动物细胞在体内的环境。
（2）已知雨蛙素（CAE）可以诱导细胞自噬。一些小分子RNA（siRNA）可以特异性的降解同源mRNA，从而抑制特定基因的表达。通过DNA重组技术导入特定的基因可以使细胞中该的基因表达量提高。下表显示了部分实验处理方法，“+”表示施加处理，“-”表示不施加处理，请在①②③后面的横线处填“+”或“-”，以完善实验方案：
处理方法 | A 组 | B组 | C组 | D组 |
加入雨蛙素 | - | + | ① | + |
导入 MasⅠ-siRNA | - | - | + | ② |
导入 MasⅠ基因 | - | - | ③ | + |
处理①_____；处理②________；处理③_____。
（3）细胞中的LC3蛋白表达量同细胞自噬程度呈正相关，可以使用_____法检测细胞中LC3的表达量，用以反映细胞自噬的情况。实验结果如图所示：
注：图中红色荧光的分布范围和亮度与LC3蛋白的表达量呈正相关
分析实验结果可知，与MasⅠ基因低表达组相比，高表达组细胞自噬现象_____。由此提示，若能_________________________________________，则有利于保护AP细胞。
下图表示利用现代生物技术培养转基因克隆牛的技术流程，用以生产新冠病毒疫苗，请你完善该流程，并回答问题：
（1）①过程首先要构建_____文库，再利用 PCR 或分子杂交技术获取抗原基因。
（2）下列物质中用于体外重组 DNA 的有_____。
A．限制酶 B．DNA 连接酶 C．解旋酶 D．Taq 酶
（3）如果供体牛1是优质高产奶牛，供体牛2 是优质公牛,则细胞1可以是下列哪种细胞_____。
A．完成体外受精的受精卵
B．供体1提供细胞核，供体牛2 提供细胞质的重组细胞
C．供体2提供细胞核，供体1提供细胞质的重组细胞
D．供体1和2有性杂交的受精卵培养形成的胚胎干细胞
（4）对细胞1除了要进行_____的鉴定之外，还需要对____进行鉴定才能得到的满足生产需求的细胞2。二者都可以采用_________方法；而后者还可以在细胞水平进行鉴定，选择性染色体组成为_____的细胞继续培养。
（5）在对④进行分割时要注意_____，得到多个胚胎后，利用⑤胚胎移植技术使多个受体母牛妊娠，就可以期待多个转基因克隆牛的降生了。
（6）如果供体1和供体2都是雌性，则流程中的③是利用了_____技术。
利用植物修复技术治理重金属污染的实质是将某种特定的植物种植在被重金属污染的土壤上，植物收获后进行妥善处理，就可将重金属移出土壤．目前科学家尝试应用生物工程技术培育符合植物修复技术要求的转基因植物。请根据以上材料回答下列问题：
（1）土壤中的重金属通过_____逐级富集，从而危及人类的健康。
（2） 在应用植物修复技术治理重金属污染的土壤时， 需选择符合要求的植物， 这遵循了生态工程的___________原理。
（3）能够富集土壤中重金属的基因可能来自某种微生物，这体现了生物多样性的_____价值。获得目的基 因后可采用_________技术进行扩增。大部分物种的基因能拼接在一起，是因为它们的分子结 构都是_____________结构。检测目的基因是否成功导入植物细胞，可采用的生物技术 是_____。
（4）将含有目的基因的植物细胞培养成转基因植株时，培养基中需要调整_____以诱导其脱分化、 再分化的过程。若要制成人工种子，则在培养到_____阶段，在外面包裹人工_________即可。
2012 年诺贝尔生理学或医学奖授予约翰·伯特兰·戈登和山中伸弥，以表彰他们在“体细胞重编程技术”领域做出的革命性贡献。请回答下列问题：
（1）1962 年约翰·伯特兰·戈登通过实验把蝌蚪肠上皮细胞的细胞核移植进入去核的卵细胞中，成功培育出“克隆青蛙”。此实验说明已分化的动物体细胞的_____具有全能性。
（2）所谓“体细胞重编程技术”是将高度分化的体细胞重新诱导回早期干细胞状态，即获得诱导多能干（iPS）细胞。山中伸弥于 2006 年把 4 个关键基因通过逆转录病毒转入小鼠的成纤维细胞，使其转变成 iPS 细胞。在该技术中，逆转录病毒是这 4 个关键基因的_____，在其协助下 4 个基因进入成纤维细胞，并整合到其染色体 DNA 上。
（3）培养 iPS 细胞时，培养液需要特别加入的天然成分是_____，同时 iPS 细胞需置于_____恒温培养箱中培养。
（4）iPS 细胞可诱导分化成各种细胞类型以应用于临床研究。现用胰高血糖素基因片段做探针，对 iPS 细胞分化成的甲、乙、丙细胞进行检测，结果如下表：
用探针检测细胞的 DNA | 用探针检测细胞的 RNA | ||||||
iPS 细胞 | 甲细胞 | 乙细胞 | 丙细胞 | iPS 细胞 | 甲细胞 | 乙细胞 | 丙细胞 |
+ | + | + | + | - | - | + | - |
注：“+”表示能检测到，“-”表示不能检测到
得到此检测结果采用的是_________技术；结果表明 iPS 细胞通过_____定向分化为乙细胞，乙 细胞最可能是_____细胞。
现代人们对生物工程技术发挥的作用褒贬不一，但生物工程在为人们提供需要的生物新品种或新产品方面确实发挥了重要作用。请回答下列问题：
（1）转人生长激素基因牛发生的可遗传变异是_________；基因表达载体除了包含目的基因、启动子、终止子、复制原点外，还应具有____；②过程常采用的技术是_____。
（2）③过程用到的生物技术手段有_____和胚胎移植。如欲得到基因型相同的两头牛犊，可在_____阶段，采用_________技术达到此目的，两头牛的性别_____（填“相同”或“不同”）。
（3）将prG（基因）导入浆细胞制备单克隆抗体的过程中，应进行多次_________检测，Ⅲ代表的细胞具有_________的特点，具有此类功能的细胞还可以通过_____（技术）方法获得。
（4）在抗虫棉培育过程中，棉花受体细胞进一步培养形成_________组织，然后经过_____形成抗虫棉植株，该过程所依据的原理是_________。若要获得该种抗虫棉的无病毒植株，应选用其_____处的组织进行培养。
（5）将抗虫基因插入Ti质粒的_________上构成重组Ti质粒。④过程常用的方法是_____法。
