Question

为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图 A 所示的实验。

（1）配制好的培养基灭菌通常可以使用_________法。步骤③与步骤②中培养基成分的最大区别是________    。

（2）同学乙用稀释涂布平板法进行了过程④的操作：将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接入0．1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为_________。

（3）步骤⑤需要震荡培养，其目的是提高培养液溶氧量，同时使_________，提高营养物质利用率。

Answer

高压蒸汽灭菌 石油是唯一碳源 5.7×107 菌体与培养液充分接触

【解析】

1、微生物常见的接种的方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

2、分析图B：图B采用的是稀释涂布平板法，但涂布不均匀。

（1）配制好的培养基通常使用高压蒸汽灭菌法灭菌。步骤③与步骤②中培养基成分相比，最大的区别是石油是唯一碳源。

（2）同学乙也按照同学甲的接种方法进行了步骤④的操作：将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接人0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57，据此可得出每升样品中的活菌数为（56+58+57）÷3÷0.1×1000×100=5.7×107个。

（4）步骤⑤需要振荡培养，原因是提高培养液中（溶解）氧的含量，通过振荡可使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。