Question

某生物兴趣小组利用酵母菌开展相关探究实验。在500mL的已煮沸、冷却的质量分数为5%的葡萄糖溶液中接种一定量的酵母菌，在适宜的条件下培养，探究酵母菌种群大小的动态变化。分析回答：

（1）培养液要煮沸冷却后才能接种酵母菌，将葡萄糖溶液煮沸的主要目的是___________，冷却后才接种酵母菌可防止 ___________。

（2）对10mL的培养液中酵母菌完全统计是非常困难的，可以采用__________________法。

（3）本实验没有另设对照实验，原因是___________________________。

（4)血球计数板计数时，对于压在小方格界线上的酵母菌应如何计数？______。

（5）本实验中，某学生的部分实验操作过程是这样的：①把酵母菌培养液放置在适宜的环境中培养，连续7天取样计数；②用无菌吸管从静置试管底部吸取酵母菌培养液少许；③加入血球计数板计数室，再盖上盖玻片，并用滤纸吸去多余菌液。请纠正该同学实验操作中的2个错误。①__________________；②______________________；

Answer

消灭杂菌 高温杀死酵母菌 抽样检测 该实验在时间上形成前后对照 计数相邻两边及其顶点 取样前振荡试管 先盖上盖玻片，在盖玻片一侧再加滴加样液

【解析】

用血球计数板计数酵母菌悬液中酵母菌个数步骤：

（1）样品稀释：便于酵母菌悬液的计数，以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜，一般稀释10倍即可。

（2）将血球计数板用擦镜纸擦净，在中央的计数室上盖上盖玻片。

（3）将稀释后的酵母菌悬液，用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘，使菌液缓缓渗入，多余的菌液用吸水纸吸取，稍待片刻，使酵母菌全部沉降到血球计数室内。

（4）计数时，如果使用16格×25格规格的计数室，要按对角线位，取左上，右上，左下，右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数。如果规格为25格×16格的计数板，除了取其4个对角方位外，还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数。 

（5）当遇到位于小格线上的酵母菌，一般只计数小方格的上方和左方线上的酵母细胞。

（6）对每个样品计数三次，取其平均值，按公式计算每1mL菌液中所含的酵母菌个数。

（1）煮沸葡萄糖溶液的目的是消灭杂菌，冷却后接种的目的是防止高温杀死酵母菌。

（2）检测酵母菌种群密度的方法是抽样检测法。

（3）该实验统计酵母菌种群大小的动态变化，说明该实验需要在不同时间进行分别检测，从而在时间上形成前后对照。

（4）计数时，对于压在小方格界线上的酵母菌应采用计数相邻两边及其顶点的方法，例如：计上不计下，计左不计右。

（5）② “用无菌吸管从静置试管底部吸取酵母菌培养液少许”操作错误，应该在取样前振荡试管，充分摇匀培养液，防止出现误差。③“加入血球计数板计数室，再盖上盖玻片，并用滤纸吸去多余菌液”操作错误，应该先盖上盖玻片，在盖玻片一侧再加滴加样液。