Question

为了提取当地环境中的独特菌种，某研究小组以优质高粱、上等小麦为原料，制作培养基，搜集、分离空气中的微生物。他们还尝试制作其他一些发酵产品。请回答下列问题：

（1）培养基在接种微生物前，必须先进行________（灭菌方式），培养基按照用途分成________培养基和_________培养基。

（2）将上述培养基暴露在空气中培养一段时间后，取10g该培养基，用无菌水制成100mL样品溶液，再将样品溶液稀释10³倍后，各取样品溶液0．1 mL在5个细菌培养基平板上接种，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。该过程采取的接种方法是________，每克培养基样品中的细菌数量为______×10⁷个；与血细胞计数板相比，此计数方法测得的细菌数目较实际值____，原因是___________________________            

（3）制作葡萄果酒的主要微生物是_______，其代谢类型是_______，其产物乙醇与______________试剂反应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇的检验。

（4）如果把葡萄果酒制成葡萄果醋，要适时进行充气，因为醋酸菌将酒精变成醋酸时需要______的参与。

（5）制作泡菜时，应选用火候好、无裂纹、无砂眼的泡菜坛，坛盖边沿的水槽应注满水，并且要时常补充水槽中的水，因为乳酸菌需要______的环境。泡菜坛内有时会长一层白膜，这层白膜主要是由_______的繁殖造成的。

Answer

高压蒸汽灭菌 选择 鉴别 稀释涂布平板法 1．75 小 两个菌落重叠长在一起 酵母菌 异养兼性厌氧型 重铬酸钾 氧气 无氧 酵母菌

【解析】

1、用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，选择菌落数在30～300的进行记数，求其平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数。
2、①酵母菌是一种单细胞真菌，在有氧和无氧的条件下都能生存，属于兼性厌氧菌，因此便于用来研究细胞呼吸的不同方式。②CO2可使澄清石灰水变混浊，也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间长短，可以检测酵母菌培养CO2的产生情况。③橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与乙醇（酒精）发生化学反应，在酸性条件下，变成灰绿色。

（1）培养基在接种微生物前，必须先进行灭菌，对培养基一般使用高压蒸汽灭菌。该培养基是以优质高粱、上等小麦为原料制作的，目的是搜集、分离空气中的微生物，按用途分该培养基属于选择培养基。
（2）用于计数细菌菌落数的常用接种方法是稀释涂布平板法，统计的菌落数应介于30～300之间，故选择细菌菌落数为156、178和191的平板计数。每克该土壤样品中的菌落数为（156+178+191）÷3÷0.1×100÷10×103=1.75×107，由于两个或多个菌体未分离形成一个菌落时，往往统计的是一个菌落，所以用此计数方法测得的细菌数较实际值偏少。
（3）酿酒的主要微生物是酵母菌，其代谢类型是异养兼性厌氧型，其产物乙醇与酸性重铬酸钾试剂反应呈现灰绿色。
（4）醋酸菌为需氧型，所以若把葡萄果酒制成葡萄果醋，要适时进行充气。
（5）乳酸菌为厌氧型，制作泡菜时需要创造无氧的环境。泡菜坛内有时会长一层白膜，这层白膜主要是由酵母菌的繁殖造成的。