Question

水稻 R 基因的等位基因 R₁与 R₂ 存在一个碱基对的差异，为检测水稻的基因型，使用存在 1 个碱基错配的引物对 3 株水稻的 R 基因局部进行 PCR 扩增后，用限制酶 HinfⅠ切割并电泳（如下图）。下列相关叙述错误的是（    ）

A.在 R₁基因和 R₂基因的差异序列中，不含限制酶 HinfⅠ的酶切位点

B.引物中存在 1 个碱基错配，导致 R 基因经 PCR 扩增后 1 个碱基对改变

C.扩增后的R₂片段有 1 个 HinfⅠ的酶切位点，而扩增后的 R1 片段没有

D.电泳结果显示，植株 1 为纯合子，植株 2 和植株 3 为杂合子

Answer

D

【解析】

基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

A、由图可知，在R1基因和R2基因的差异序列中，不含限制酶HinfⅠ的酶切位点，A正确；
B、因为引物中存在1个碱基错配，导致R基因经PCR扩增后1个碱基对改变，B正确；
C、根据酶切结果可知，扩增后的R2片段有1个HinfⅠ的酶切位点，而扩增后的R1片段没有HinfⅠ的酶切位点，C正确；
D、电泳结果显示，植株1和植株2为纯合子，植株3为杂合子，D错误。
故选D。