Question

花椰菜和黑芥均为十字花科植物，花椰菜易患黑腐病（致病菌为黄单胞杆菌属细菌）。拟通过植物体细胞杂交技术（如图1），将黑芥的抗黑腐病基因引入到花椰菜中。

（1）在用酶解法制备原生质体时，需先用较高渗透压的溶液处理植物细胞，使细胞处于微弱的_____状态，然后用_____消化去除细胞壁，获得原生质体。

（2）用不同剂量紫外线处理黑芥原生质体，统计愈伤组织数和再生植株率，结果如图2。由图2可知，处理黑芥原生质体的适宜紫外线剂量为_____J·cm^-2， 此处理下融合细胞的_____能力较强，既能得到大量愈伤组织，再生植株率也最高。

（3）杂种细胞经组织培养发育成植株，该过程所用培养基中包括水、无机盐、有机营养等营养物质，此外还需加入一定浓度和比例的_____，以调节细胞的发育方向。

（4）杂种细胞分裂过程中会丢失来自黑芥的部分染色体，有时会发生染色体易位，这使杂种植株染色体组成呈现多样性。如何对杂种植株进行选择和培育，才能得到既抗黑腐病、又最大程度减少非目标性状的花椰菜植株？请写出基本思路。_____

Answer

失水 纤维素酶和果胶酶 0.1 再生 植物激素 对杂种植株接种黑腐病菌，能正常生长的即为具有高抗性的杂种植株

【解析】

1、当外界溶液浓度大于细胞液浓度时，细胞发生质壁分离，细胞失水。2、可以用纤维素酶和果胶酶去除植物的细胞壁，制备原生质体。3、对杂种植株进行接种黑腐病菌筛选出具有高抗性的杂种植株。

（1）使用高渗透压的溶液处理植物细胞，使细胞处于微弱的失水状态。植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，故采用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。
（2）由图可知，处理黑芥原生质体的适宜紫外线剂量为0.1J·cm-2，此浓度下融合细胞的再生能力较强。
（3）植物组织培养过程中需调节植物激素的种类和比例，以保证愈伤组织再分化并得到完整的植株。
（4）对杂种植株接种黑腐病菌，能正常生长的即为具有高抗性的杂种植株。