Question

目前流感疫苗主要的生产介质是鸡胚。研究者用犬肾细胞（MDCK 细胞）培养流感病毒，制备疫苗并测定了其免疫效果。

（1）利用合成培养基培养细胞时，培养基中需加入水、葡萄糖、_____、维生素、无 机盐等营养物质。为防止污染，需对培养液和所有培养用具进行_________处理，以及在无菌环境下进行操作。

（2）将贴壁生长型 MDCK 细胞进行驯化，可使之适应悬浮培养。与贴壁培养相比，悬浮培养利于提高细胞密度，传代培养时不需要用_____消化，操作更简单。

（3）通过克隆化培养，获得若干单克隆细胞株。需要从这些单克隆细胞株中筛选出高产流感病毒的细胞株，请写出筛选的思路_____。

（4）用 MDCK 细胞培养甲型 H1N1 流感病毒，制成疫苗后对小鼠进行免疫接种（第一次免疫两周后进行第二次免疫）。第二次免疫后两周接种甲型 H1N1 流感病毒，测定免疫效果，结果如图 1、图 2。

① 由图 1 可知，用两种疫苗免疫小鼠，均可产生较高水平的抗体，说明两种疫苗均可激发小鼠对流感病毒的_____免疫应答。

② 由图 2 可知，两种疫苗都对小鼠有较好的_____作用。

Answer

氨基酸 灭菌 胰蛋白酶 在特定的选择培养基上培养，在该选择培养基中，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有目的细胞可以存活 特异性（或体液） 免疫预防

【解析】

体液免疫过程为：（1）感应阶段：除少数抗原可以直接刺激B细胞外，大多数抗原被吞噬细胞摄取和处理，并暴露出其抗原决定簇；吞噬细胞将抗原呈递给T细胞，再由T细胞呈递给B细胞；（2）反应阶段：B细胞接受抗原刺激后，开始进行一系列的增殖、分化，形成记忆细胞和浆细胞；（3）效应阶段：浆细胞分泌抗体与相应的抗原特异性结合，发挥免疫效应。

（1）利用合成培养基培养细胞时，培养基中需要加入水、葡萄糖、氨基酸、维生素、无机盐等营养物质。为防止污染，需对培养液和所有培养用具进行灭菌处理，以及在无菌环境下进行操作。
（2）将贴壁生长型MDCK细胞进行驯化，可使之适应悬浮培养。与贴壁培养相比，悬浮培养利于提高细胞密度，传代培养时不需要用胰蛋白酶消化，操作更简单。
（3）从这些单克隆细胞株中筛选出高产流感病毒的细胞株，筛选思路为：在特定的选择培养基上培养，在该选择培养基中，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有目的细胞可以存活。
（4）①由图1可知，用两种疫苗免疫小鼠，均可产生较高水平的抗体，说明两种疫苗均可激发小鼠对流感病毒的特异性免疫应答。
② 由图 2 可知，两种疫苗作用下小鼠的存活率都高于对照组，说明两种疫苗都对小鼠有较好的免疫预防作用。