某生物兴趣小组为有关酶产品设计如下的商业广告或使用说明,合理的是( )
A.果胶酶:能彻底分解果肉细胞壁,让您的果汁更清亮
B.溶菌酶含片:补充您特异性免疫反应才能产生的溶菌酶,您值得拥有
C.多酶片:为了您下一次的使用效果,请置于冰箱冷藏
D.生物酶牙膏:增强口腔细胞跨膜运输的能力,让您的细胞充满活力
以下关于稳态的描述,错误的是( )
A.当外界环境的变化过于剧烈,内环境的稳态就会遭到破坏
B.生命系统的各个层次上,都普遍存在着稳态现象
C.不管是动物体生命活动的调节,还是生态系统稳定性的调节都存在着反馈调节以维持稳态
D.依靠神经—体液—免疫调节网络就能维持机体的稳态
阅读下面的材料,回答问题
胰岛素的应用是糖尿病治疗历史上的一个里程碑。胰岛素自1922年用于临床以来,就成为治疗糖尿病的特效药物。目前全世界糖尿病患者已超过四亿,为临床提供充足、质量可靠的胰岛素制剂是现代生物制药领域的一项重要工程。
人胰岛素由胰岛 β 细胞合成,核糖体上最初形成的是前胰岛素原单链多肽,进入内质网腔后,信号肽被切除,形成胰岛素原。高尔基体内的特异性肽酶将胰岛素原的 C 肽区域切除,A 链和 B 链通过二硫键形成共价交联的活性胰岛素(如图)。
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最初用于临床的胰岛素几乎都是从猪、牛胰脏中提取的。猪、牛胰岛素与人胰岛素生理功能相似,但氨基酸序列有微小差异。接受动物胰岛素治疗的患者有5%~10%出现不同程度的过敏反应,抗动物胰岛素抗体还可能对患者的胰岛 β 细胞功能产生负面影响。
随着基因工程技术的发展,重组人胰岛素逐渐取代动物胰岛素。早期的重组人胰岛素生产,采用A、B链分别表达法。后来该方法被胰岛素原表达法取代,即由大肠杆菌合成胰岛素原,然后经细胞外酶切获得胰岛素。1987年用酵母菌生产重组人胰岛素的方法出现。重组人胰岛素的结构与人体自身分泌的胰岛素结构完全相同,但无法完全模拟生理胰岛素曲线,容易导致血糖波动,甚至导致低血糖发生。
上世纪90年代,科学家通过改变胰岛素的氨基酸序列和结构,研制出能更好模拟生理胰岛素分泌特点的胰岛素类似物,包括速效胰岛素和长效胰岛素类似物。例如,将人胰岛素 B 链第28位的脯氨酸替换为天门冬氨酸,可有效抑制胰岛素单体的聚合,皮下注射这种速效胰岛素类似物后,起效快(10-20分钟起效)、血药浓度峰值高、药效消失快,已经在临床上广泛应用。
(1)用猪胰岛素进行治疗,易诱导人体产生抗猪胰岛素抗体,原因是_____。
(2)人胰岛素基因有 2 个内含子。利用大肠杆菌通过胰岛素原法生产重组人胰岛素,获取目的基因时,不宜采用的方法是_____
a.直接从细胞内总 DNA 中分离目的基因
b.用化学方法直接人工合成目的基因
c.以 mRNA 为模板逆转录合成目的基因
d.利用 PCR 扩增人胰岛素原基因的编码序列
(3)与大肠杆菌相比,利用酵母菌生产胰岛素的优势有_____。
(4)重组人胰岛素工程菌构建完成后,还需要通过_____工程技术进行胰岛素的生产。
(5)正常人胰岛素的生理性分泌,可分为基础胰岛素分泌(24小时持续脉冲式分泌微量胰岛素,维持空腹状态下血糖稳定)和进餐后的胰岛素分泌。能更好地模拟餐时生理胰岛素曲线的是_____(选填速效或长效)胰岛素类似物。
(6)请写出通过蛋白质工程,构建胰岛素类似物工程菌的基本过程_______________________。
新型冠状病毒是一种单链 RNA 病毒,新型冠状病毒感染的常规检测方法是通过实时荧光 PCR 鉴定。
(1)首先,从样本中提取病毒RNA,经_____酶作用生成cDNA。然后以cDNA为模板 进行实时荧光PCR扩增,测定样品中病毒核酸量。
(2)通过实时荧光PCR扩增目的基因,需额外添加荧光标记探针(一小段单链DNA,可与目的基因中部序列特异性结合)。当探针完整时,不产生荧光。在PCR过程中,与目的基因结合的探针被TaqDNA聚合酶水解,R与Q分离后,R发出的荧光可被检测到(如图 1)。
① 当样本中有目的基因时,引物和探针与目的基因退火,通过形成_____而特异性结合。
② 在 PCR 循环的_____阶段,TaqDNA 聚合酶催化子链的合成并水解探针。检测到的荧光强
(3)在通过实时荧光 PCR 检测新型冠状病毒感染时,检测到的荧光强度变化如图 2 所示。
① 与指数增长期相比,线性增长期目的基因数量的增长率下降,原因有_____。
② Ct 值的含义:在 PCR 扩增过程中,每个反应管内的荧光信号达到设定的荧光阈值时所经历的扩增循环数。因此,当样本中初始模板越多时,Ct 值就_____。
③ 某新型冠状病毒核酸检测说明书标明,Ct≤37 判定为阳性,Ct>40 或无 Ct 值判定为阴性。图 2 所示新型冠状病毒核酸检测结果应判定为_____。
(4)阴性结果也不能排除新型冠状病毒感染。可能产生假阴性的因素有_____。
a.取样太早,样本中病毒量少,达不到实时荧光 PCR 检测阈值
b.样本被污染,RNA酶将病毒RNA降解
c.病毒发生变异
禾谷镰刀菌可侵染小麦等作物,使其产量和品质下降。研究者通过构建融合基因 Ve-FG 并转化拟南芥,以期实现转基因植物抗禾谷镰刀菌的目的。
(1)利用 PCR 技术,将野生番茄的抗黄萎病基因 Ve 与禾谷镰刀菌的识别基因 FG 进行重组,构建融合基因 Ve-FG(如图 1)。
① 设计 3 对引物。其中引物 2 的一部分序列与 C 片段一部分序列互补,另一部分序列与_____片段一部分序列互补。
② 通过 PCR 分别克隆A、C、P 片段。克隆 A 片段应选用的引物是_____。
③ 以 A、C、P 片段为_____进行延伸,将 A、P、C 片段拼接,再以引物 1、4 进行 PCR,扩增融合基因 Ve-FG。
(2)用_____将 Ve-FG 与质粒连接,构建重组质粒(如图 2,图中潮霉素抗性基因只在植物细胞中表达)。将农杆菌与重组质粒混合,一段时间后涂布到含有_____的平板培养基上进行筛选。用含重组质粒的农杆菌转化拟南芥,几周后收获种子,种在含有潮霉素的培养基上,获得转基因拟南芥株系 1 和株系 2。
(3)分别提取株系 1 和 2、非转基因拟南芥植株叶片中的 DNA 作为模板,PCR 扩增 Ve-FG 基因后进行电泳,结果如图 3。
① 电泳时应以_____为阳性对照。
② 成功导入 Ve-FG 基因的是_____。
③ 株系 1 可抗潮霉素,但电泳结果无阳性条带,原因可能是_____。
(4)为检验融合基因 Ve-FG 的功能,以导入 Ve-FG 基因的植株为实验组,导入空白质粒的植株为对照组,分别接种_____。一段时间后观察发现,与对照植株相比,实验组整体长势更旺盛,叶片萎蔫程度、叶片变黄程度也较轻,这表明_____。
目前流感疫苗主要的生产介质是鸡胚。研究者用犬肾细胞(MDCK 细胞)培养流感病毒,制备疫苗并测定了其免疫效果。
(1)利用合成培养基培养细胞时,培养基中需加入水、葡萄糖、_____、维生素、无 机盐等营养物质。为防止污染,需对培养液和所有培养用具进行_________处理,以及在无菌环境下进行操作。
(2)将贴壁生长型 MDCK 细胞进行驯化,可使之适应悬浮培养。与贴壁培养相比,悬浮培养利于提高细胞密度,传代培养时不需要用_____消化,操作更简单。
(3)通过克隆化培养,获得若干单克隆细胞株。需要从这些单克隆细胞株中筛选出高产流感病毒的细胞株,请写出筛选的思路_____。
(4)用 MDCK 细胞培养甲型 H1N1 流感病毒,制成疫苗后对小鼠进行免疫接种(第一次免疫两周后进行第二次免疫)。第二次免疫后两周接种甲型 H1N1 流感病毒,测定免疫效果,结果如图 1、图 2。
① 由图 1 可知,用两种疫苗免疫小鼠,均可产生较高水平的抗体,说明两种疫苗均可激发小鼠对流感病毒的_____免疫应答。
② 由图 2 可知,两种疫苗都对小鼠有较好的_____作用。