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三位高中生在某个炎热夏日相约去吃冰激凌,之后两人都出现腹泻现象,于是他们怀疑冰激...

三位高中生在某个炎热夏日相约去吃冰激凌,之后两人都出现腹泻现象,于是他们怀疑冰激凌中的大肠杆菌含量超标。老师建议他们利用所学有关微生物培养的知识对冰激凌进行检测。经查阅资料后,他们提出如下实验设计思路。

   立即去卖冰激凌的小店再买一个同样品牌的同种冰激凌;配制伊红-亚甲基琼脂培养基(该培养基可用来鉴别大肠杆菌,生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈现深紫色,并有金属光泽)、灭菌、倒平板;取10mL刚融化的冰激凌作为原液,然后进行梯度稀释,稀释倍数为1×101×105;取每个浓度的冰激凌液各01mL,用涂布平板法进行接种,每个浓度涂3个平板;在适宜温度下培养48小时,统计菌落数目。

1)请你从下面3个角度对这三位同学的思路进行评议。

他们只打算对一个冰激凌进行检测,理由是:两个人吃过冰激凌后,都腹泻了,所以再检测一个就足以说明问题。你同意这样的观点吗?请阐述理由__________________

有没有必要对冰激凌原液进行梯度稀释?请阐述理由____________________。(提示:我国卫生部门规定的饮用水标准是:37oC培养24h的条件下1mL自来水中细菌总数不可以超过100个;37oC培养48h的条件下1000mL自来水中大肠杆菌菌落不能超过3个)

他们认为,在用该方法统计菌落数目时不需要设计对照组,所以只准备培养15个平板。你认为在这项检测中是否需要对照组?请阐述理由__________________

2)下图所示为4种菌落分布图,一般不能由涂布平板法得到的是_______

3 如果以菌落数代表样品中的大肠杆菌数量,则统计结果比实际值是偏大还是偏小?请阐述理由__________________

4)如果实验结果显示检测的冰激凌中大肠杆菌超标了,接下来他们应该做什么?_____

5202051日起,北京市实行新版《北京市生活垃圾管理条例》,在下列垃圾类别中,冰激凌包装袋、雪糕棒等属于_______

A、厨余垃圾     B、可回收物     C、有害垃圾     D、其他垃圾

 

不同意,因为检测样品少,不能确定是某个冰激凌的质量问题还是这个品牌冰激凌的质量问题 有必要,培养基的菌落数在30-300之间易于平板计数,如不稀释,可能会因菌落数过密而无法计数 需要,排除空白平板等无关变量对结果无干扰 D 偏小,因为两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。(偏大,在操作过程中被大肠杆菌污染,可能数目会增加) 向商家说明情况,或向有关部门投诉 D 【解析】 微生物的培养计数时使用稀释涂布平板法,统计公式为:C/V×M,其中C表示平均菌落数,V表示接种到平板上的菌液体积,M表示稀释倍数。 (1)①不同意,检测一个不能说明问题,具有偶然性,检测样品少,不能确定是某个冰激凌的质量问题还是这个品牌冰激凌的质量问题; ②为了好计数,使培养基的菌落数在30-300之间易于平板计数,有必要稀释,如不稀释,可能会因菌落数过密而无法计数; ③需要设置对照组,要检测培养基灭菌是否合格,以及排除空白平板等无关变量对结果无干扰; (2)D图中菌落没有均匀生长,还有明显的划线痕迹,是平板划线法接种得到的,D不能由涂布平板法得到; (3)严格无菌操作时,会偏小,当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落;没有严格无菌操作时,也有可能会偏大,当操作过程中被大肠杆菌污染,可能数目会增加; (4)如果实验结果显示检测的冰激凌中大肠杆菌超标了,应该向商家说明情况,或向有关部门投诉; (5)冰激凌包装袋、雪糕棒等属于其他垃圾,故选D。
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考点分析:
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马铃薯是一种分布广泛、适应性强、产量高、营养价值丰富的粮食和经济作物,培育脱毒和抗毒的马铃薯品种是解决马铃薯质量退化和产量下降的有效方法。

1)马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒,茎尖离体培养大致过程如图1 所示,马铃薯茎尖外植体大小对苗的脱毒率和成活率的影响如图2所示。请回答问题:


 

①依图1分析,马铃薯脱毒苗培养依据的主要原理是______________。将微茎尖接种在添加有植物激素的培养基中,经过____________________________完成组织培养过程,获得试管苗。对脱毒苗进行病毒检测时,可采用_____________________方法检测病毒的基因。

②由图2可知,茎尖越小,__________________________,因此大小为________mm的茎尖外植体适宜马铃薯脱毒苗的培养

2)研究表明将感染马铃薯的病毒(遗传物质是DNA)的蛋白质外壳基因导入马铃薯体内可以获得抗病毒的植株。

 ①简述将马铃薯病毒的蛋白质外壳基因转入马铃薯基因组中,获得抗病毒马铃薯的基本过程____________

②在个体水平鉴定马铃薯植株是否具有抗病毒特性的方法是________________________,观察其生长状况。

 

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神经纤毛蛋白-1NRP-1)是血管内皮生长因子的新型受体,通过参与多种信号转导来促进肿瘤血管的生成。本研究将为 NRP-1 单克隆抗体靶向治疗乳腺癌提供数据基础。

1)取乳腺癌(MCF7)组织块,运用____________技术获得 MCF7 细胞用于后续实验。 给小鼠注射重组的人____________蛋白后,将小鼠产生免疫反应的B细胞与__________融合,制备杂交瘤细胞。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养, 吸取培养孔中的__________(填上清液沉淀细胞),应用____________技术进行抗体阳性检测。经多次筛选和细胞培养,获得 NRP-1 单克隆抗体(NRP-1 Mab)。

2)提取正常组织细胞和MCF7细胞的总蛋白,设置空白对照,加入NRP-1 Mab进行蛋白质免疫印迹(将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到膜上,然后用特异性抗体检测抗原的技术),实验结果如下:

 

该实验结果说明了____________________________________

3)将MCF7细胞制成单细胞悬液,等量注入4组裸鼠右前腋下,接种后3天开始给药,共给药7次。每隔5天测算一次肿瘤的肿瘤体积,如下图所示。

对照组注射________,从上图中可以看出________________________

4)结合题干信息,综合以上研究请你推测NRP-1 Mab抑制肿瘤的作用机理是________

 

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胰岛素AB链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。图1是该方法所用的基因表达载体,图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白AB分别表示β-半乳糖苷酶与胰岛素AB链融合的蛋白)。请回答下列问题:

1)图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是_____________________

2)图1中启动子是________酶识别和结合的部位,有了它才能启动目的基因的表达;氨苄青霉素抗性基因的作用是_________________________

3)构建基因表达载体时必需的工具酶有___________________

4β-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达,可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部,其意义在于_____________________________

 

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有丝分裂中存在如下图所示的检验机制,SAC蛋白是该机制的重要蛋白质。

1)与有丝分裂相比,减数分裂中染色体特有的行为有___________。(写出两种)

2)图A细胞处于有丝分裂的_______期,结构①是______________________

3)如图所示,②表示染色体的___________,一开始SAC蛋白位于②上,如果

_____________________SAC蛋白会很快失活并脱离,当所有的SAC蛋白都脱离后,细胞进入图D所示的时期,APC被激活。注: APC-后期促进因子

4)此机制出现异常,经常会导致子细胞中染色体数目改变,请结合已有知识解释本检验机制对有丝分裂正常进行的意义_______________________________________

5)体外培养甲状腺细胞,待细胞进入快速增殖期,分别加入浓度为011050mmol/LKI溶液处理24h。收集各组培养液测定乳酸脱氢酶(LDH)含量,计算LDH漏出率。取各组培养的细胞,检测并分析细胞周期及细胞凋亡率。实验结果如下:

KImmol/L

LDH漏出率

G1

S

G2—M

凋亡率

0

3407%

6009%

3259%

715%

964%

1

3747%

5969%

3404%

629%

1048%

10

3739%

6039%

3504%

628%

1080%

50

4327%

7284%

1866%

850%

1476%

 

(注:分裂间期分为G1期、S期、G2期,其中S期为DNA分子复制期;M表示分裂期)

LDH是细胞内含有的酶,LDH漏出率的测定结果说明_____________________

细胞周期是细胞正常生长的关键,50mmol/L KI作用于甲状腺细胞24h,细胞周期会阻滞细胞于_______期进行DNA修复,如果无法修复,就会诱导细胞_______

 

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为研究铁皮石斛的光合特性,研究人员测定了铁皮石斛在光、暗条件下的CO2吸收速率,结果如下图。


 

1)在有光条件下,铁皮石斛吸收的CO2_________中被固定为_________,然后生成糖类等有机物。

2)虽然黑暗条件下,铁皮石斛通过_____产生并释放CO2,但实验结果显示,暗期铁皮石斛CO2吸收总量始终_________,这不同于一般植物。

3)科研人员进一步测定了铁皮石斛中酸性物质的含量变化,结果发现,酸性物质在暗期上升,光期下降,推测CO2能够在暗期转化为________储存起来,在光期_______。但是在暗期,并不能将CO2转化为糖类等光合产物,原因是________

4)为了研究这种作用的生理意义,科研人员测定了铁皮石斛气孔开放程度变化情况,结果如下图。


 

结果发现,暗期气孔开放程度________光期。综合上述结果推测,铁皮石斛在光期条件下吸收CO2不足,而暗期可以________,进而提高光合速率。

 

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