Question

以小鼠肿瘤组织为实验材料，开展了一系列生物学研究，回答下列问题：

（1）将获得的肿瘤细胞培养液稀释100倍后，用血细胞计数板（规格为2mm×2mm×0．1mm）计数，观察到的计数室中细胞分布如图。

①培养液中肿瘤细胞的密度是_____________。

②若在实验操作时，用滴管从静置的肿瘤细胞培养液中取样稀释后再计数，则得到的结果比实际值_____________。

（2）某同学要利用该肿瘤细胞建立肿瘤小鼠模型，在给小鼠接种肿瘤细胞前用射线照射小鼠的_____________器官，降低小鼠的_____________功能，以增加建模成功率。

（3）TdR（胸腺嘧啶核苷）是常用的一种DNA合成抑制剂。适当浓度的TdR就可阻断DNA的正常复制，而不影响其他时期细胞的运转。某瘤细胞X各时期经历时间依次为G₁期为10h、S期6h、G₂期8h、M期1h。

科学家利用X细胞和TdR做了如下实验，每组设置多个重复样品。（统计各时期细胞数所占百分比的具体方法不做要求）

分组：A组：培养液+X细胞+TdR（用生理盐水配置）

B组：……

第一步：培养19h后，检测统计A、B两组各时期细胞数所占百分比（第一次检测）。

第二步：……

检测统计：A、B两组各时期细胞数所占百分比（第二次检测）

①写出B组添加试剂情况_____________

②设计一张表格记录A、B两组第一次检测统计的结果，并将预期结果填入表中_____________

③科学家最终想要通过一系列处理使A组的所有细胞均处于G₁和S期的交界处，以使细胞周期同步化，请将后续步骤补充完整。_____________

Answer

3．75×107个/mL 偏大或偏小 胸腺 细胞免疫 培养液+X细胞+生理盐水

G1

S

G2

M

A组

76%

24%

0%

0%

B组

40%

24%

32%

4%

将A组中的TdR全部洗去，更换新鲜培养液培养6h（6h-19h之间的任一时间均可），再向A组中加入TaR培养

【解析】

本题考查恶性肿瘤的防治，动物细胞与组织培养过程。动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。

（1）①培养液中肿瘤细胞的密度是：（5+6+6+6+7）÷80×400÷（2×2×0.1×10-3）×100=3．75×107个/mL。

②用滴管从静置的肿瘤细胞培养液中取样，如果取样位置偏上，则得到的结果比实际值偏低；如果取样位置偏下，则得到的结果比实际值偏高。

（2）由于胸腺是T淋巴细胞成熟的场所，给小鼠接种肿瘤细胞前用射线照射小鼠的胸腺器官，降低小鼠的细胞免疫功能，以增加建模成功率。

（3）①为了排除生理盐水对实验结果的影响，B组添加试剂情况为培养液+X细胞+生理盐水。②设计一张表格记录A、B两组第一次检测统计的结果，如下：

③科学家最终想要通过一系列处理使A组的所有细胞均处于G1和S期的交界处，以使细胞周期同步化，应补充的步骤：将A组中的TdR全部洗去，更换新鲜培养液培养6h（6h-19h之间的任一时间均可），再向A组中加入TaR培养。