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科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞(iPS),继而利用iPS细胞...

科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞(iPS),继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠,流程如下:


 

1)从黑鼠体内获得体细胞后,对其进行的初次培养称为__________,培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止分裂,这种现象称为____________________

2)图中2-细跑胚胎可用人工方法从灰鼠子宫内获得,该过程称为__________;也可从灰鼠体内取出卵子,通过__________后进行早期胚胎培养获得。

3)图中重组囊胚通过__________技术移入白鼠子宫内继续发育。

4)小鼠胚胎干细胞(ES)可由囊胚的__________分离培养获得。iPSES细胞同样具有发育全能性,有望在对人类iPS细胞进行定向__________后用于疾病的细胞治疗。

 

原代培养 接触抑制 冲卵 体外受精 胚胎移植 内细胞团 诱导分化 【解析】 1.哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞,来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来; 2.胚胎干细胞的特点:具有胚胎细胞的特性,在形态上表现为体积小,细胞核大,核仁明显;在功能上,具有发育的全能性,可分化为成年动物体内任何一种组织细胞.另外,在体外培养的条件下,可以增殖而不发生分化,可进行冷冻保存,也可进行遗传改造; 3、胚胎干细胞可用于治疗人类的某些顽症,如帕金森综合症。还可培育出人造器官,解决目前临床上存在的供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。 (1)从黑鼠体内获得体细胞后,对其进行的初次培养称为原代培养,培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止分裂,这种现象称为接触抑制。 (2)图中2-细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得,该过程称为冲卵;也可从灰鼠体内取出卵子,将其培养到一定时期再通过体外受精后进行早期胚胎培养获得。 (3)重组囊胚通过胚胎移植技术移入白鼠子宫内继续发育,暂不移入的胚胎可使用超低温冷冻方法保存。 (4)小鼠胚胎干细胞(ES)可由囊胚的内细胞团细胞分离培养获得.iPS与ES细胞在功能上都具有发育全能性,因此对人类iPS细胞进行定向诱导分化后用于疾病的细胞治疗,这种技术称为治疗性克隆。
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考点分析:
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科学家用细胞工程的方法培育出了蔬菜新品种——“白菜—甘蓝”,它具有生长期短、耐热性强和易储存等优点。下图是“白菜—甘蓝”培育过程示意图,请完成下列问题:

 

1)白菜和甘蓝的体细胞在融合之前应先用_____________处理两种细胞的细胞壁获得原生质体,然后再用_____________作为促融剂诱导原生质体融合,融合利用的生物学原理是___________________

2)由杂种细胞D培育成“白菜—甘蓝”植株,采用的技术手段是_____________,该过程说明植物细胞具有_____________。植物体细胞杂交技术的优点是__________________________

3)要制备“白菜—甘蓝”的人工种子,要以cd步骤得到____________________________________________________等材料,包裹上人造种皮即可。

4)在d过程培养中除了提供水分、无机盐、糖类、氨基酸外,还需要在培养基中加入_____________;同时,在培养过程中除必要的温度、光照和氧气等外界条件外,另一个成功的关键是操作过程中必须保证_____________

 

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下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamH Ⅰ、Hind Ⅲ、Sma Ⅰ直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答下面的问题。

1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用___________________(填限制酶的名称)限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因;连接产物要用到DNA连接酶,按其来源不同,可分为两类,即__________________________

2)理论上讲,构建基因表达载体时的连接产物可能有_______________________________________三种重组DNA

3)筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含__________________________的培养基上进行。

4)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是_____________

A.启动子    B tetR    C.复制原点    DampR

5)不同生物的基因可以拼接的结构基础是__________________________

6)大肠杆菌是首先成功表达外源基因的宿主菌,但不能表达结构复杂的蛋白质,哺乳类细胞、昆虫细胞表达系统虽然能表达结构复杂的哺乳类细胞蛋白,但操作复杂,表达水平低,不宜推广使用。基因工程中常选用酵母菌作为受体细胞,请从细胞结构方面分析用酵母菌作受体细胞能克服上述不足的理由是__________________________

 

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下图为通过DNA分子杂交鉴定含有某特定DNA的细菌克隆示意图。下列叙述正确的是

A.根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目

B.外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制

C.重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接

D.放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置

 

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下面是四种不同质粒的示意图,其中ori为复制必需的序列,amp为氨苄青霉素抗性基因,tet为四环素抗性基因,箭头表示同一种限制性内切酶的酶切位点。下列有关叙述正确的是(   

     

A.基因amptet是一对等位基因,常作为基因工程中的标记基因

B.质粒指细菌细胞中能自我复制的小型环状的DNA和动植物病毒的DNA

C.限制性核酸内切酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的氢键

D.用质粒4将目的基因导入大肠杆菌,该菌不能在含四环素的培养基上生长

 

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下图为某生物工程操作流程模式图,下列说法正确的是(    )

A. 若此图表示基因工程的操作流程,若A为质粒,则B表示重组DNA分子

B. 若此图表示动物细胞融合过程,则形成C(杂种细胞)的原理是细胞全能性

C. 若此图为试管婴儿培育过程,则应包括体外受精、胚胎移植和胚胎培养等方面

D. 若此图为试管牛生产的流程图,则获得A(精子)后可直接与B进行体外受精

 

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