Question

下列实验程序有错误的是（    ）

A.原生质体 A +原生质体B杂交原生质体

B.浆细胞 + 骨髓瘤细胞    产生特定抗体的杂交瘤细胞

C.动物组织制备细胞悬液 → 原代培养 → 传代培养

D.离体细胞消毒、接种愈伤组织试管苗

Answer

A

【解析】

1、单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，在经过三次筛选：①筛选能够产生单一抗体的B淋巴细胞②筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）③筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。两次抗体检测：专一抗体检验阳性，获得能产生特异性抗体、又能大量增殖杂交瘤细胞。最后从培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体。
2、植物组织培养过程：离体的细胞、组织或器官脱分化形成愈伤组织再分化形成胚状体最后发育成植株。

A、原生质体A和原生质体B融合采用物理方法（离心、振动、电激）和化学方法（聚乙二醇），A错误；
B、浆细胞和骨髓瘤细胞融合，需要筛选两次，筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞），筛选出能够产生特异性抗体的细胞群，B正确；
C、胰蛋白酶能将组织细胞分散开来，进行原代培养，由于存在接触性抑制，再用胰蛋白酶能将组织细胞分散开来，进行传代培养，C正确；
D、离体细胞消毒、接种，然后脱分化形成愈伤组织，再分化形成试管苗，D正确。
故选A。