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为了增加菊花花色类型,研究者从其他植物中克隆出花色基因C(图1),拟将其与质粒(...

为了增加菊花花色类型,研究者从其他植物中克隆出花色基因C(图1),拟将其与质粒(图2)重组,再借助农杆菌导入菊花中。

下列操作与实验目的不符的是(   

A.用限制性核酸内切酶EcoR I和DNA连接酶构建重组质粒

B.用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织,将C基因导入细胞

C.在培养基中添加卡那霉素,筛选被转化的菊花细胞

D.DNA分子杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上

 

C 【解析】 1、基因工程的基本工具:分子手术刀”是指限制性核酸内切酶(限制酶)、“分子缝合针”是指DNA连接酶、“分子运输车”是指载体。 2、基因工程的基本操作程序有四步:①目的基因的获取,②基因表达载体的构建,③将目的基因导入受体细胞,④目的基因的检测与鉴定。 3、标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素抗性基因。 4、目的基因的检测和表达: (1)首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子杂交技术。 (2)其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA,方法是用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。 (3)最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是从转基因生物中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原-抗体杂交。 (4)有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。 A、根据目的基因两侧的限制酶切割位点可知,用限制性核酸内切酶EcoRⅠ和DNA连接酶构建重组质粒,A正确; B、将目的基因导入到植物细胞常用农杆菌转化法,即用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织,将C基因导入细胞,B正确; C、图2中显示标记基因是潮霉素抗性基因,因此可在培养基中添加潮霉素,筛选被转化的菊花细胞,C错误; D、检测C基因是否整合到菊花染色体上用DNA分子杂交技术,D正确。 故选C。
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考点分析:
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小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应,为了克服这个缺陷,可选择性扩增抗体的可变区基因(目的基因)后再重组表达。下列相关叙述不正确的是(   

A.设计扩增目的基因的引物时必须与表达载体的序列相配对

B.PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列

C.PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶

D.一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞

 

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多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述若干次循环:95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是

A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现

B.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成

C.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸

D.PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高

 

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下图表示从细菌中获取目的基因的两种方法,以下说法中错误的是(   

A.甲方法可建立基因组文库

B.乙方法可建立cDNA 文库

C.甲方法要以核苷酸为原料

D.乙方法需要逆转录酶参与

 

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下列有关限制性核酸内切酶的说法,正确的是(      )

A.限制酶主要是从真核生物中分离出来的

B.限制酶的识别序列只能由6个核苷酸组成

C.限制酶能识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开

D.限制酶切割产生的DNA片段末端都为黏性末端

 

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下列叙述符合基因工程概念的是(  )

A.B淋巴细胞与肿瘤细胞融合,杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因

B.将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌,获得能产生人干扰素的菌株

C.用紫外线照射青霉菌,使其DNA发生改变,通过筛选获得青霉素高产菌株

D.自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA

 

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