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阅读下面的材料,回答文后的问题。

植物生物反应器-植物工厂

生物反应器是利用酶或生物体(如微生物)所具有的生物功能,在体外进行生化反应的 装置系统,是一种生物功能模拟机,如发酵罐、固定化酶或固定化细胞反应器等。传统的生 物反应器存在工艺控制、产品安全等问题。植物生物反应器主要以整株植物、植物组织或植 物悬浮细胞为加工场所,生产药物蛋白。

叶绿体遗传转化体系是近年发展起来的一种新的植物生物反应器。它是以叶绿体为外源 DNA 受体的一种转化方式。将叶绿体特异性启动子、终止子等序列和外源基因整合作为目的 基因,然后将目的基因、标记基因及叶绿体来源的基因片段构建成表达载体,转入叶绿体后 使目的基因插入叶绿体基因组,最后筛选获得转基因植株。与植物细胞核表达体系相比,叶绿体遗传转化体系具有明显优势:叶绿体由双层膜包裹且无蛋白外流,为重组蛋白表达提供了一个相对安全的生物环境;叶绿体有自己独特的 DNA 复制、转录和翻译体系,在基因转录、 翻译等方面具有原核特性;叶绿体基因组拷贝数多,外源基因表达效率高;叶绿体基因组含有多基因可共同表达;可以防止转基因作物的目的基因通过花粉在自然界中扩散。

HIV 是获得性免疫缺陷综合征的病原体,目前仍缺乏有效疫苗。2012 年,研究人员以 HIV 病毒包膜蛋白上的 V3 环和 C4 结构域序列的基因作为外源基因,在烟草叶绿体中成功表 C4V3 抗原蛋白。通过实验证明,烟草叶绿体中表达的 C4V3 蛋白能够引发免疫反应。

1)植物生物反应器主要依赖____等现代生物学技术,以物组织或细胞作为物生反应器,生产医药蛋白。

2)构建叶绿体遗传转化体系时,需要的工具酶有____。构建的 基因表达载体中含有____,使得目的基因只能在叶绿体中表达。

3)植物叶绿体表达体系可以防止转基因作物的目的基因通过花粉在自然界中扩散,原 因可能是___________

A.转基因植物与其他植物间不能通过花粉进行基因交流

B.受精卵中的细胞质几乎全部来自卵细胞

C.植物杂交的后代不会出现性状分离

4)将含有插入目的基因的叶绿体叶片组织制作成生产药物蛋白生物反应器的后续操作 包括 _____________________________

5)为检验烟草叶绿体中表达的 C4V3 蛋白能够引发免疫反应,研究人员用缓冲液溶解C4V3 蛋白后,每周 4 次、每次用相同剂量的 C4V3 蛋白溶液注射小鼠。发现小鼠体 内产生抗体反应,T 细胞增殖且有淋巴因子生成。请指出该实验设计的不足,并加 以修正________________________

 

基因工程和细胞工程 限制酶和 DNA 连接酶 叶绿体特异性启动子 B 脱分化形成愈伤组织,对愈伤组织进行培养,提取所需产物。或者 脱分化形成愈伤组织,再分化得到植株,从植株中提取所需产物。 该实验设计缺少对照组;对照组应每周 4 次、每次用 C4V3 蛋白溶液等量的缓冲液注射小鼠,检测 小鼠体内的抗体反应,T 细胞增殖情况以及淋巴因子的生成。 【解析】 1、基因工程的工具:(1)限制酶:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。(2)DNA连接酶:连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。(3)运载体:常用的运载体:质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。2、植物细胞工程技术的应用:植物繁殖的新途径(微型繁殖、作物脱毒、人工种子)、作物新品种的培育(单倍体育种、突变体的利用)、细胞产物的工厂化生产。 (1)植物生物反应器主要以整株植物、植物组织或植物悬浮细胞为加工场所,生产药物蛋白。这首先需要用基因工程技术将目的基因导入植物细胞,其次需要采用植物细胞工程技术将转基因植物细胞培育成转基因植株或转基因植物组织或转基因植物悬浮细胞,因此采用的现代生物技术包括基因工程和细胞工程技术。 (2)构建叶绿体遗传转化体系时,需要的工具酶有限制酶和DNA连接酶。要使得目的基因只能在叶绿体中表达,则构建的基因表达载体中要含有叶绿体特异性启动子。 (3)由于受精卵中的细胞质几乎全部来自卵细胞,因此植物叶绿体表达体系可以防止转基因作物的目的基因通过花粉在自然界中扩散。故选B。 (4)将转基因植物细胞培育成植物生物反应器的过程是:脱分化形成愈伤组织,对愈伤组织进行培养,提取所需产物(或者脱分化形成愈伤组织,再分化得到植株,从植株中提取所需产物)。 (5)实验设计需要遵循对照原则,因此该实验设计缺少对照组,对照组应为:每周4次、每次用C4V3蛋白溶液等量的缓冲液注射小鼠,检测小鼠体内的抗体反应,T细胞增殖情况以及淋巴因子的生成。
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水稻基因组中的 B 基因仅在体细胞(2n)和精子中正常表达,在卵细胞中不转 录。科研人员为研究 B 基因表达对卵细胞的影响,设计了如下实验。据图回答问题:

1B 基因在水稻卵细胞中不转录,推测其可能的原因是卵细胞中____

A.含 B 基因的染色体缺失    BDNA 聚合酶失活

CB 基因发生了基因突变    DB 基因的启动子无法启动转录

2)从水稻体细胞或____中提取总 RNA,构建____文库,进而获得 B 基因编码 蛋白的序列。将该序列与 Luc 基因(表达的荧光素酶能催化荧光素产生荧光)连接成融 合基因 B-LUC(表达的蛋白质能保留两种蛋白质各自的功能),然后构建重组表达载体。

3)在图示过程中,过程____ T-DNA 整合到受体细胞染色体 DNA 上,过程____在培养基中应加入卡那霉素。(填写序号)。对获得的转基因植株鉴定筛选的方法为_______________________

4)图中转基因植株未成熟种子中有存在由未受精的卵细胞发育形成的胚,而一般情况下水 稻卵细胞在未受精时不进行发育,由此表明____________________________________________

5)现有甲(R1R1r2r2r3r3)、乙(r1r1R2R2r3r3)、丙(r1r1r2r2R3R3)三个水稻抗病品种,抗病(R)对感病(r)为显性,三对抗病基因位于不同染色体上。根据基因的 DNA 序列设计特异性引物,用 PCR 方法可将样本中的 R1r1R2r2R3r3 区分开。这 种方法可用于抗病品种选育中基因型的鉴定。 甲品种与感病品种杂交后,对 F2 不同植 株的 R1r1 进行 PCR 扩增。已知 R1 r1 片段短。从扩增结果(下图)推测可抗病的 植株有_______________

6)将目的基因导入植物细胞除图示的农杆菌转化法,还可以用________________________________________法。

 

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带状疱疹是一种由带状疱疹病毒(HSV)引起的急性疱疹性皮肤病,利用动物细胞工程技术制备出抗 HSV 的单克隆抗体可快速检测 HSV。回答下列问题:

1)在制备抗 HSV 单克隆抗体过程中,先给小鼠注射一种纯化的 HSV 蛋白,一段时间后,若小鼠血清中抗_________的抗体检测呈阳性,说明小鼠体内产生了_______免疫反应。

2)依据细胞膜的_________的特点,运用化学试剂________诱导B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合。再经过筛选、检测,最终可获得所需的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞的特点是___________________

3)若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体,可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的腹腔中使其____,再提取腹水进行离心,从而得到所需抗体,该抗体具有________等特性。

4)科学工作者正在研究用于治疗癌症的“生物导弹”,即单克隆抗体上连接抗癌药物。 “生物导弹”治疗癌症与普通化疗相比的优势是__________________

 

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酸奶由牛奶经过发酵制成,口味酸甜细滑,营养丰富,深受人们喜爱,利用酸奶机可居家自制酸奶。分析并回答下列问题:

1)为检测某品牌酸奶中乳酸菌的数量,检验人员进行了下图所示的实验。

①配制图示中的培养基不能加抗生素,原因是抗生素__________不能发酵成酸奶。为防止杂菌污染,需要对培养基进行________

②接种微生物的方法有很多,图中过程③所示的方法为____,用该方法统计样本菌落数时,需要同时做ABC 三个培养皿,目的是______________________________。实验时检测时,若各取0.1mL已稀释105倍酸奶分别接种到图示ABC培养基上培养,记录的菌落数分别为555657,则每毫升酸奶样品中的乳酸杆菌数为_______________个。

2)酸奶机相当于恒温培养箱,能够将其内容物加热至42℃并保持恒温。有位同学周末用酸奶机按如下步骤自制酸奶:   

从微生物培养角度看,鲜奶相当于培养基,鲜奶中加入酸奶相当于___________。上述步骤该同学能否成功制得酸奶?试述理由。_____________________________

 

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研究发现某种突变型水稻的叶绿素含量仅是野生型水稻的51%,但其光合速率与野 生型水稻差异不显著。为了探究其生理学机制,科研人员将突变型水稻与野生型水稻分组 培养,测得两组叶片的光合速率如下图1所示。进一步测定叶片中 Rubisco 酶含量如下 2所示。据图分析并回答下列问题:

1)实验过程中对突变型水稻与野生型水稻正常施用氮肥,氮肥中的 N 可参与光合作用有关的____等的合成。

2)欲测定叶片中叶绿素含量,首先取新鲜叶片,用____作溶剂,并加入少量________,快速充分研磨。然后过滤并测定滤液的吸光度,计算得出叶绿素含量。

3)由图 1 可知,在光照强度大于1000µmol·m-2·s-1条件下,突变型水稻叶片的光合速率比 野生型_______。图 2 Rubisco 酶的作用是催化暗反应中三碳化合物的还原, 该酶发挥作用的场所在________,同时需要光反应提 ________

4)结合图 1、图 2 分析,突变型水稻的叶绿素含量低,但产量与野生型差别不大的原因可能是_________________________

 

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下图为真核细胞结构及细胞内物质转运过程示意图。请回答下列问题:


 

1)图中有膜的细胞器有________(填图中序号)。这些细胞器膜和细胞膜、核膜共同组 成了该细胞的____系统。组成生物膜的基本骨架是_______________

2)图中④和⑤表示的细胞器分别是____,二者的共同点是_____________。(写出两点)

3)图中 mRNA 合成需要的原料是_____________

 

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