Question

科研人员以抗四环素基因为标记基因，通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的 β-珠蛋白，治疗鼠的镰刀型细胞贫血症。下列相关实验设计中正确的是（    ）

A.用 β-珠蛋白基因的编码序列加启动子、终止子、抗四环素基因等元件来构建表达载体

B.利用小鼠的成熟红细胞提取 mRNA，再经逆转录可获得 β-珠蛋白基因的编码序列

C.用含有四环素的培养基筛选出能繁殖的大肠杆菌，即可产生β-珠蛋白

D.用 Ca^2＋处理大肠杆菌后，将表达载体导入具有四环素抗性的大肠杆菌中

Answer

A

【解析】

基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术，个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

基因表达载体的组成包括启动子、目的基因、标记基因和终止子，因此用β-珠蛋白编码序列加启动子、抗四环素基因等元件来构建基因表达载体，A正确；小鼠的成熟红细胞中提取不到mRNA，B错误；导入大肠杆菌的可能是普通质粒或重组质粒，用含有四环素的培养基筛选出的大肠杆菌，不一定含有β-珠蛋白基因，则不能生产β-珠蛋白，C错误；标记基因是四环素抗性基因，因此受体细胞不能具有四环素抗性，即用Ca2+处理大肠杆菌后，将表达载体导入不具有四环素抗性的大肠杆菌中，D错误，故选A。