Question

下图是利用基因工程技术生产可食用疫苗的部分过程,其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。下列有关说法正确的是

A. 构建基因表达载体需要用到EcoRⅠ、PstⅠ两种限制酶

B. 若用图中四种限制酶同时切割质粒，可以产生四个DNA片段

C. 表达载体中除图示标注的结构外还应有启动子和终止子等调控因子

D. 筛选含重组质粒的受体细胞时应在培养基中加入卡那霉素抗性基因

Answer

ABC

【解析】

质粒上和含抗原基因的DNA中含有的限制酶的酶切位点相同。SmaⅠ的识别位点位于抗原基因中，PstⅠ、EcoRⅠ的识别位点分别位于抗原基因的两端；选择PstⅠ、EcoRⅠ切割含抗原基因的DNA不会破坏抗原基因的结构。质粒上的卡那霉素抗性基因为标记基因，可供重组DNA的鉴定和选择。

题图显示：抗原基因中存在SmaⅠ的识别位点，使用SmaⅠ切割含抗原基因的DNA会破坏抗原基因的结构，抗原基因的两端分别含有PstⅠ、EcoRⅠ的识别位点，用PstⅠ、EcoRⅠ切割含抗原基因的DNA，能保持抗原基因结构的完整性，所以构建基因表达载体需要用到EcoRⅠ、PstⅠ两种限制酶，A正确；质粒是一种很小的双链环状DNA分子，若用图中四种限制酶同时切割质粒，可以产生四个DNA片段，B正确；表达载体中除图示标注的结构（目的基因、标记基因）外还应有启动子和终止子等调控因子，C正确；筛选含重组质粒的受体细胞时应在培养基中加入卡那霉素，D错误。