Question

回答下列有关果胶酶生产及固定化应用的问题：

（1）菌种筛选：为了获得高产果胶酶的菌株，用射线处理一些霉菌后，稀释并接种在低浓度果胶为唯一碳源的培养基中培养，此培养基的pH要求__________（填中性偏酸或中性偏碱或中性）。

（2）菌种鉴定：通过在__________（物理性质）培养基上观察菌落的形态特征，实现菌种的鉴定。

（3）果胶酶的固定化：取磁性壳聚糖微球固体颗粒，加入果胶酶溶液，30℃条件下振荡1h后装柱，上述固定化果胶酶的方法属于__________，反应柱使用后要用__________洗涤，放置于4℃蒸馏水保存。

（4）果胶酶活力测定：以1g果胶酶单位时间催化产生的主要产物__________的量计算酶的活力。已知3，5-二硝基水杨酸与果胶水解主要产物共热，能产生棕红色的氨基化合物，在一定范围内产物的量和反应液颜色深浅成正比，可用光电比色法测定产物的量。此方法需要制作标准曲线，其中纵坐标一般为__________。

Answer

中性偏酸 固体 吸附法 10倍体积蒸馏水 半乳糖醛酸 OD值

【解析】

本题考查果胶酶的活性测定，固相化酶的应用。果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得更容易，果胶被果胶酶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。

（1）为了获得高产果胶酶的菌株，用射线处理一些霉菌后，稀释并接种在低浓度果胶为唯一碳源的培养基中培养，此培养基的pH要求中性偏酸，因为霉菌适宜在偏酸性的条件下培养。

（2）固体培养基上能形成菌落，通过在固体培养基上观察菌落的形态特征，实现菌种的鉴定。

（3）取磁性壳聚糖微球固体颗粒，加入果胶酶溶液，30℃条件下振荡lh后装柱，上述固定化果胶酶的方法属于吸附法。反应柱使用后要用10倍体积蒸馏水洗涤，放置于4℃（冰箱）保存。

（4）果胶酶活力测定一般是以以1g果胶酶单位时间催化产生的主要产物半乳糖醛酸的量计算酶的活力；已知3，5-二硝基水杨酸与果胶水解主要产物共热，能产生棕红色的氨基化合物，在一定范围内产物的量和反应液颜色深浅成正比，可用光电比色法测定产物的量。此方法需要制作标准曲线，其中纵坐标一般为光密度值（OD值）。