Question

利用基因工程技术可使大肠杆菌生产人的胰岛素，下列叙述正确的是（    ）

A.用氯化钙处理大肠杆菌后，人的胰岛素基因就可以直接导入

B.DNA连接酶能把两个黏性末端经碱基互补配对后留下的缝隙“缝合”

C.若大肠杆菌中没有胰岛素产生，则可判断重组质粒未导入受体菌

D.获得胰岛素基因需要先构建一个基因文库

Answer

B

【解析】

1、基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。
2、基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

A、将人的胰岛素基因导入大肠杆菌前需要先构建基因表达载体，A错误；
B、DNA连接酶能把两个黏性末端经碱基互补配对后留下的缝隙“缝合”，即连接形成磷酸二酯键，B正确；
C、若大肠杆菌中没有胰岛素产生，可能是重组质粒未导入受体菌，也可能是目的基因没有正常表达，C错误；
D、获得目的基因的方法有：从基因文库中获取、利用PCR技术扩增、人工合成，因此获得胰岛素基因不一定需要先构建一个基因文库，D错误。
故选B。