Question

（一）酵母菌是人类较早应用于制作面包、酿酒等的一类微生物，近年来的应用越来越广。请根据所学知识，回答下列问题：

（1）葡萄表面白色的果粉中含有天然酵母，可将其溶解于水中并制成悬浮液。现欲从含细菌的悬浮液中分离出酵母菌，应选择______（A．无碳培养基B．添加抗生素的培养基C．无氮培养基D．高浓度食盐的培养基）。获得的菌落在______培养基中扩大培养数天后，利用______消除杂菌污染，得到纯的酵母菌。

（2）利用酵母酿酒时，可以在发酵早期加极少量的蔗糖，有利于______。若在发酵瓶中加入约200g的蔗糖，可获得含糖量高的果酒，酒精含量可达______（体积分数）

（3）在泡菜制作过程中有许多微生物，期间可形成有机酸和醇类物质，还有一定量的______（致癌物质）。这种物质采用光电比色法检测时，所使用显色剂的制备原料均需要用______瓶保存。

（二）回答与基因工程和植物克隆有关的问题：

（1）利用基因克隆技术从野生稻中克隆得到抗白叶枯病基因并转入水稻细胞，常利用______法将重组DNA转入普通水稻细胞。提取到目的基因后进行扩增，可利用______技术，也可以______。

（2）该水稻的培养细胞所诱导出的再生植株，在多次传代培养后，会丧失______。长期培养中，培养物的______和器官发生能力下降，可能的原因不可能是（________）

A．细胞或组织中激素平衡被打破            B．成胚性的细胞系的产生

C．染色体不可逆的畸变                    D．非整倍体的产生

Answer

B 液体 单菌落的分离（涂布分离或划线分离） 使酵母迅速发生作用 15% 亚硝酸盐（亚硝酸或亚硝酸钠） 棕色 农杆菌转化法 PCR 将重组DNA转入宿主细胞如细菌，通过细胞的无性繁殖进行扩增（回答出导入宿主细胞，让细胞增殖/扩增/分裂就给分） 全能性的表达能力 胚胎发生 B

【解析】

1、培养基按其特殊用途可分为加富培养基、选择性培养基和鉴别培养基。选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。

2、参与泡菜制作的微生物主要是乳酸菌，因此泡菜发酵过程中，会产生多种酸，其中主要是乳酸，还有少量的亚硝酸。对亚硝酸盐的定量测定可以用比色法。

3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（一）（1）从含细菌的悬浮液中分离出酵母菌，应采用添加抗生素的选择性培养基进行培养，在该培养基上，细菌不能存活，酵母菌属于真菌，能够存活。

故选B。

把获得的菌落在液体培养基中扩大培养数天后，利用单菌落的分离（涂布分离或划线分离）消除杂菌污染，得到纯的酵母菌。

（2）利用酵母酿酒时，可以在发酵早期加极少量的蔗糖，及时给酵母提供碳源，有利于酵母迅速发挥发酵作用；若在发酵瓶中加入约200g的蔗糖，可获得含糖量高的果酒，酒精含量可达15%。

（3）在泡菜制作过程中有许多微生物，期间可形成有机酸和醇类物质，还有一定量的亚硝酸盐（亚硝酸或亚硝酸钠）。这种物质采用光电比色法检测时，所使用显色剂的制备原料均需要用棕色瓶保存，防止见光分解。

（二）（1）获得转基因水稻，常利用农杆菌转化法将重组DNA转入普通水稻细胞。提取到目的基因后进行扩增，可利用PCR技术，也可以将重组DNA转入宿主细胞，通过细胞的无性繁殖进行扩增。

（2）利用该水稻的培养细胞所诱导出的再生植株，在多次传代培养后，会丧失全能性的表达能力；长期培养中，培养物的胚胎发生和器官发生能力下降，可能的原因：①有染色体畸变，细胞核变异或非整倍体产生，且其结果是不可逆的；②细胞或组织中激素平衡被打破；③细胞对外源生长物质的敏感性发生该改变；④由于其他各种原因产生了缺乏成胚性的细胞系。

离体培养中通常把具有类似胚细胞性质、容易调控分化表达全能性的一类细胞称为胚性细胞，在某些特殊原因的作用下，可能出现缺乏成胚性的细胞，但概率较低。

故选B。