Question

肥胖已经严重危害人类健康。3T3-L1前脂肪细胞是小鼠胚胎来源、具有纤维母细胞形态的细胞株，在胰岛素（INS)、地塞米松（DEX)和3-异丁基-1-甲基-黄嗓呤（IBMX)的共同刺激下，具有100%分化成成熟脂肪细胞的能力，是目前国际上体外研究肥胖及脂代谢常用的细胞模型。为研究发酵大麦提取物对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响，科研人员进行了相关实验。将一定数目的植物乳杆菌接种到经过处理的粉碎过筛大麦和水的混合液中，制备发酵大麦提取物（LFBE)。除不接种植物乳杆菌外，其余操作方法相同，制备未发酵大麦提取物（RBE)。实验处理及结果如下。（表格中+表示加入了该物质，-表示未加入）

组别 处理方法	模型组	空白组	对照组（提取物浓度ug/mL）	实验组（提取物浓度ug/mL）
100	200	400	100	200	400
3T3-L1前脂肪细胞+培养液	+	+	+	+	+	+	+	+
1              ；	+	-	-	-	-	-	-	-
2              ；	-	-	+	+	+	-	-	-
3              ；	-	-	-	-	-	+	+	+

（1）表格处理方法1、2、3的变量分别是__________、__________、_________。

（2）实验结果：经RBE处理3TL3-L1前脂肪细胞诱导分化后，与模型组相比，中低浓度的RBE均未显著减少细胞分化率，400ug/mLRBE处理组细胞分化率为模型组的90%。与模型组细胞相比，经LFBE处理3TL3-L1前脂肪细胞诱导分化后，低、中和高三个浓度的LFBE均能显著减少细胞分化率。与RBE相比，LFBE明显抑制3T3-L1前脂肪细胞分化且随浓度增加，抑制能力加强，其中400ug/mLLFBE组细胞分化率只占模型组的40%，仅比空白组多14%。请用柱状图表示出所得实验结果。

______

（3）要观察3T3-L1前脂肪细胞分化成成熟脂肪细胞的程度，可用_________染色，典型的成熟脂肪细胞的形态表现为细胞进一步增大，呈圆形，胞内布满__________色脂滴，密集于核周，形成“指环样”结构。

（4）多种激素和生长因子在脂肪细胞分化过程中发挥着重要的作用。近些年的研究显示，这些激素或生长因子在作用于脂肪细胞膜表面的________后，经不同信号通路的信号传递，通过直接或间接的修饰调控脂肪细胞分化的转录因子活性，进而实现对脂肪细胞分化的调控。

Answer

INS、DEX、IBMX RBE LFBE 苏丹Ⅲ 橙黄色 特异性受体

【解析】

本题考查实验设计、脂肪的鉴定，激素作用特点相关知识，意在考察考生对知识点的理解、作图和应用能力。

（1）实验中要遵循单一变量的原则，由题意可知3T3-L1前脂肪细胞在胰岛素（INS)、地塞米松（DEX)和3-异丁基-1-甲基-黄嗓呤（IBMX)的共同刺激下，具有100%分化成成熟脂肪细胞的能力。而该实验研究的是发酵大麦提取物对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响所以实验表格中处理方法1应标准模型应是INS、DEX、IBMX三者都有，2组应是对照组即未发酵大麦提取物RBE，3应是实验组RBE。
（2）根据实验结果作图即可，以细胞分化率为纵坐标，以不同浓度的RBEH和LFBE为横坐标，1组作为标准模型即分化率为100%为标准对照，因为400ug/mLLFBE组细胞分化率只占模型组的40%，通过计算空白对照组应占40%-14%=26%；图中要表示出400ug/mLLFBE组细胞分化率只占模型组的40%，因为随着LFBE浓度增加，抑制能力加强，所以低浓度的LFBE细胞分裂率比该浓度的要高即可。
（3）脂肪可以用苏丹Ⅲ进行染色，会出现橙黄色的现象。
（4）激素和生长因子需要与特异性受体结合后才能发挥作用，所以只有作用于脂肪细胞膜表面的特异性受体后才能发挥调节作用。