Question

变性作用是指核酸双螺旋结构被破坏，双链解开，但共价健并未断裂引起变性的因素很多，升高温度、过酸、过碱以及加入变性剂等都能造成核酸变性PCR的反应过程中引起变性的因素是（    ）

A.pH过高 B.pH过低

C.加入酒精 D.升高温度

Answer

D

【解析】

PCR技术：

1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

2、原理：DNA复制。

3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。

4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）

5、过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

标准的PCR过程一般分为变性、复性、延伸三大步，其中变性需要高温使DNA解螺旋，温度为94℃；而复性是在较低温度下，两种引物和DNA单链想结合，温度为55℃；延伸为在DNA聚合酶的作用下，合成新的DNA链，温度为72℃。因此，PCR技术中，引起DNA变性的因素是升高温度。

故选D。