严重联合性免疫缺陷症是一种T淋巴细胞缺乏腺苷脱氨酶(ADA)引起的疾病,通过基因工程的方法将正常ADA基因导入患者细胞中进行治疗。图1、图2分别表示正常ADA基因、金属硫蛋白基因(含有该基因的细胞能在含重金属镉的培养基中生长)和质粒(总长为3.8kb, 1kb=1000对碱基),ClaⅠ 、XbaⅠ和SacⅠ均为限制酶。
(1)通过基因工程的方法将正常ADA基因导入患者细胞中使能其产生ADA,然后再将这种细胞扩增后输入患者体内,这种治病方法叫___(填“体内”或“体外”)基因治疗。
(2)为了筛选含有目的基因的受体细胞,需要先将目的基因和标记基因连接形成融合基因。首先用限制酶ClaⅠ、XbaⅠ和SacⅠ切割正常腺苷脱氨酶基因与金属硫蛋白基因,然后用_______将它们连接形成融合基因,再将融合基因与图2的质粒构建成重组质粒时,应选用的限制酶是_______;若该融合基因长1.9kb,据图2分析,此重组质粒大小为________kb。
(3)重组质粒应导入的受体细胞是病人的_______细胞。为筛选出含重组质粒的受体细胞,需在培养基中添加的物质是_______。
利用相关工程技术可以获得抗黑腐病杂种黑芥-花椰菜植株,已知野生黑芥具有黑腐病的抗性基因,而花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病,技术人员用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化,并丧失再生能力,再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合,流程如下图。据图回答下列问题:
(1)该过程①常用到的工具酶是__________。
(2)过程②PEG的作用是__________,经过②操作后,需筛选出融合的杂种细胞,显微镜下观察融合的活细胞中有供体的__________存在可作为初步筛选杂种细胞的标志。
(3)若分析再生植株的染色体变异类型,应剪取再生植株和双亲植株的根尖,制成装片,然后在显微镜下观察比较染色体的______;将杂种植株栽培在含有__________的环境中,可筛选出具有高抗性的杂种植株。
已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原。疫苗的生产和抗体的制备流程如下图所示。请回答下列问题
(1)A基因重组载体(重组质粒)在受体细胞中表达出A蛋白,该过程除证明了质粒可以作为运载体外,还证明了生物间共用相同的__________;A基因在大肠杆菌细胞内表达时,表达出的蛋白质可能会被降解。为防止蛋白质被降解,在实验中对选用受体细胞大肠杆菌的要求是__________。
(2)图中可以作为该预防传染病的疫苗的物质是__________,X的名称是__________。
(3)利用抗A蛋白的单克隆抗体能快速诊断该病原体是由于单克隆抗体__________。
“筛选”是生物工程中常用的技术手段,下列关于筛选的叙述中错误的是( )
A.单克隆抗体制备过程中,第二次筛选的细胞既能无限增殖又能产生特定抗体
B.植物体细胞杂交过程中,原生质体融合后获得的细胞需要进行筛选
C.基因工程中通过标记基因筛选出的细胞一定是都含有重组质粒
D.在诱变育种中需要通过筛选才能得到数量较少的有利变异
下列技术依据DNA分子杂交原理的是
①用DNA分子探针诊断疾病
②B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的杂交
③快速灵敏的检测饮用水中病毒的含量
④目的基因与运载体结合形成重组DNA分子
A.②③ B.①③ C.③④ D.①④
某线性DNA分子含有5000个碱基对(bp),先用限制酶a切割,再把得到的产物用限制酶b切割,得到的DNA片段大小如下表。限制酶a和b的识别序列和切割位点如下图所示。下列叙述正确的是
a酶切割产物(bp) | b酶再次切割产物(bp) |
2100;1400;1000;500 | 1900;200;800;600;1000;500 |
A.a酶与b酶切断的化学键并不相同
B.不同的限制酶a与b识别的序列不同,因此切出的末端不同
C.在该DNA分子上a酶与b酶的切割位点分别有3个和2个
D.基因工程中的限制酶主要是从酵母菌等真核生物中分离纯化得到