Question

微卫星DNA是广泛分布于真核生物基因组中的简单重复序列。由于重复单位的重复次数在个体间呈高度特异性并且数量丰富，因此，微卫星DNA可以作为分子标记，并有着广泛应用。

（1）为了分离捕获到某种生物的微卫星DNA分子标记，可以用生物素标记的特定简单重复序列作为探针，与该生物的__________（填“基因组”或“cDNA”）文库进行杂交，然后再经多个步骤筛选获取微卫星DNA。

（2）扩增分离到的微卫星DNA序列的技术方法为__________，其原理是__________。其反应体系中含缓冲液、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物、____________________及__________酶等。

（3）对微卫星DNA进行体外扩增的基本反应步骤为____________________。

（4）从图中4种引物中选择正确的引物，并在_____内用箭头表示子链延伸的方向。

（5）根据“微卫星DNA”的特点判断，这种分子标记可应用于_____（填字母）。

A．人类亲子鉴定B．种群遗传多样性研究

C．诱导基因突变D．冠状病毒遗传物质测序

Answer

基因组 PCR DNA双链复制的原理 模板DNA 热稳定DNA聚合 DNA解链—引物结合到互补链—互补链的合成（—重复）（变性、复性/退火、延伸}

注：I、II、III、IV是引物 AB

【解析】

1、利用PCR技术扩增目的基因的前提，是要已知目的基因两端的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。
2、PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。
3、PCR的基本操作步骤：变性→复性→延伸。其产量成指数形式扩增。

（1）基因组文库包含一种生物的全部基因，所以为了分离捕获到某种生物的微卫星DNA分子标记，可以用生物素标记的特定简单重复序列作为探针，与该生物的基因组文库进行杂交，然后再经多个步骤筛选获取微卫星DNA。

（2）扩增分离得到微卫星DNA序列的技术方法为PCR，其原理是DNA双链复制。其反应体系中含缓冲液、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物及模板DNA、热稳定DNA聚合酶等。

（3）PCR的基本反应步骤为变性→复性→延伸。

（4）因为DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链，所以引物应选用如图中Ⅰ和Ⅳ，延伸方向为注：I、II、III、IV是引物

（5）AB、微卫星DNA是真核生物基因组中的简单重复序列，由于重复单位的重复次数在个体间呈高度特异性并且数量丰富，可以作为分子标记应用于人类亲子鉴定、种群遗传多样性研究，A、B正确；

C、诱导基因突变的因素有物理、化学、生物因素三种，而微卫星DNA的特性与诱导基因突变的因素无关，C错误；

D、冠状病毒的遗传物质是RNA，无法使用微卫星DNA作为分子标记，D错误。

故选AB。