Question

新型冠状病毒的检测可以采用实时荧光RT-PCR（逆转录聚合酶链式反应）的方法，RT-PCR的具体过程如图。下列有关叙述错误的是（    ）

A.过程①以mRNA为模板合成单链DNA

B.过程②③拟对单链cDNA进行n次循环的扩增，理论上需要n个引物B

C.该技术用于对某些微量RNA病毒的检测，可提高检测的灵敏度

D.游离的脱氧核苷酸只能从引物的3＇端开始连接

Answer

B

【解析】

多聚酶链式反应扩增DNA片段：
1、PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4中游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。
2、PCR反应过程是：变性→复性→延伸

3、结果：上述三步反应完成后，一个DNA分子就变成了两个DNA分子，随着重复次数的增多，DNA分子就以2n的形式增加。PCR的反应过程都是在PCR扩增仪中完成的。

A、过程①是由mRNA形成单链DNA的过程，表示逆转录，A正确；

B、决定实时荧光RT-PCR扩增片段的是引物；过程②、③拟对单链cDNA进行n次循环的扩增，根据DNA分子半保留复制特点可知，该过程理论上至少需要2n-1个引物B，B错误；

C、利用实时荧光RT-PCR技术对某些微量RNA病毒进行检测时可提高检测的灵敏度，是因为增加了待测RNA逆转录产生的DNA的数量（或浓度），便于检测，C正确；

D、游离的脱氧核苷酸只能从引物的3'端开始连接，D正确。

故选B。