Question

生物技术实践中常会涉及微生物的培养、分离、计数及物质有效成分的提取等内容。请回答下列问题。

（1）幽门螺杆菌是急慢性胃炎的主要致病菌，该病菌可以利用尿素进行生长繁殖。将从患者体内采集的样本制成菌液，培养在___________的选择培养基上进行“浓缩”。若培养基中加入酚红指示剂，则该菌落周围会出现___________环带，这与菌体内___________酶的作用密切相关。为长期保存该菌种，需要采用_____法。

（2）纯化菌种时通常使用的划线工具是___________。划线的某个平板经培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落。分析造成第二划线区域的第一条线上无菌落的可能原因是___________。

（3）常用___________进行活菌计数，其原理是___________。但统计的菌落数往往___________(填“多于”或“少于”)稀释液中的活菌数，原因是_____________________________ 。

（4）苦橙味道虽苦，但浑身是宝。苦橙的果皮、花朵以及未成熟的果实均可用来提取芳香油。植物芳香油组成成分比较复杂，主要包括____________，苦橙中提取出来的橙花油与其他植物芳香油一样，也具有较强的___________性。

Answer

以尿素为唯一氮源 红色 脲 甘油管藏 接种环 接种环灼烧后未冷却立即划线（或未从第一区域末端开始划线） 稀释涂布平板法 培养基表面生长的一个菌落来源于稀释液中的一个活菌 少于 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 萜类化合物及其衍生物 挥发

【解析】

能分解尿素的细菌能合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，使培养基碱性增强，pH升高，所以可以用检测pH的变化的方法来判断尿素是否被分解，可在培养基中加入酚红指示剂，尿素被分解后产生氨，pH升高，指示剂变红。

（1）由于该菌可以利用尿素生长繁殖，所以将患者体内采集的样本制成菌液，培养在以尿素为唯一氮源的选择培养基上进行“浓缩”；由于细菌在分解尿素的过程中会合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，使培养基碱性增强，pH升高，所以可以用检测pH的变化的方法来判断尿素是否被分解，即在培养基中加入酚红指示剂，尿素被分解后产生氨，pH升高，则该菌落周围会岀现红色环带；为长期保存该菌种，需要采用甘油管藏法。

（2）纯化菌株时，通常使用的划线工具是接种环；划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。可能是第二次划线过程中，接种环灼烧后未冷却（或未从第一区域末端开始）导致。

（3）稀释涂布平板法常用来进行微生物的计数，其原理是培养基表面的一个菌落来源于（稀释液中的）一个活菌；当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以统计的菌落数往往少于稀释液中的活菌数。

（4）植物芳香油的成分比较复杂，主要成分是萜类及其衍生物。苦橙中提取出来的橙花油与其他芳香油一样，也具有较强的挥发性。