Question

微生物培养技术是研究和应用微生物的基本技术，请回答下列相关问题：

（1）如果用显微镜直接计数法对细菌进行计数，所统计的细菌数通常会比稀释涂布平板法统计的数目偏_________，原因是___________________________。

（2）如果采用平板划线法分离细菌，操作时在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是___________________________。

（3）在进行稀释10倍的操作时，需用移液管吸取1mL培养的菌液，注入_________的试管中，用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸3次，使菌液与水充分_________。

Answer

高 显微镜直接计数法将活菌和死菌计数在内，在稀释涂布平板法中，可能会发生多个微生物形成一个菌落的情况 将聚集的菌体逐渐分离以便获得单个菌落 有9mL无菌水 混匀

【解析】

常用的计数方法有直接计数法和间接计数法，直接计数法是利用特定血细胞计数板，在显微镜下直接计数一定容积的样品中微生物的数量；间接计数法是当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，可推测样品中活菌数。常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。

（1）由于显微镜直接计数法将活菌和死菌计数在内，而在稀释涂布平板法中，可能会发生多个微生物形成一个菌落的情况，因此显微镜直接计数法所统计的细菌数通常会比稀释涂布平板法统计的数目偏高。

（2）采用平板划线法分离细菌时，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，从而将聚集的菌体逐渐分离，以便获得单个菌落。

（3）在进行稀释10倍的操作时，需用移液管吸取1mL培养的菌液，注入有9mL无菌水的试管中，用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸3次，使菌液与水充分混匀。