Question

高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选出了能高效生产高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示。回答下列问题：

 

（1）Ⅰ号培养基从物理状态来看，属于固体培养基，配制时要加入________作为凝固剂，平板冷凝后要将平板_______放置。

（2）配制固体培养基的基本步骤是________。

A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌

B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌

C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板

D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板

（3）溶化时，烧杯中加入琼脂后要不停地_______，防止琼脂糊底引起烧杯破裂。对培养基灭菌的方法一般为_______________。

（4）①过程是_______，②过程所使用的接种方法是___________法。

（5）部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放________分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成透明圈，挑选相应的菌落，接种到Ⅱ号培养基上进一步分离纯化后，再对菌种进行扩大培养。

Answer

琼脂 倒过来 C 搅拌 高压蒸汽灭菌法 稀释 稀释涂布平板 淀粉酶

【解析】

1、分析题图：①过程是梯度稀释，②过程是稀释涂布平板法接种，目的是筛选单菌落。从功能上看，I号培养基属于选择培养基；从物理状态上来说，Ⅱ号培养基属于固体培养基。
2、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养.在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落

（1）在液体培养基中添加琼脂可以配置成固体培养基。平板冷凝后要将平板倒过来放置。

（2）配制固体培养基的基本步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，C正确。故选C。

（3）融化时烧杯中加入琼脂后要不停地搅拌，防止琼脂糊底引起烧杯破裂。对培养基灭菌的方法一般为高压蒸汽灭菌法。

（4）分析题图可知，①过程是梯度稀释，目的是对样品进行稀释；②过程是用稀释涂布平板法进行接种。

（5）分解淀粉的嗜热菌在I号培养基上生长时可释放淀粉酶，分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成透明圈，透明圈越大淀粉酶的活性越强，所以要从中挑出透明圈大的菌落，接种到Ⅱ号培养基上。