Question

某研究小组发现类产碱假单胞菌对黄脊竹蝗有较强的感染力，并可引起其发病死亡，该小组成员以此展开实验探究。回答下列问题：

（1）用来培养类产碱假单胞菌的培养基为牛肉膏蛋白胨培养基，在此培养基中，为微生物提供碳源的物质是_____。培养基配制时，灭菌和调pH的先后顺序为______________。对培养基进行灭菌所用的仪器是___________________。

（2）在培养类产碱假单胞菌的过程中，培养皿应倒置培养，其原因是________________________。

（3）进行实验时，若要频繁使用类产碱假单胞菌，可以采用_________________的方法对其进行保存，这种方法的缺点是_______。

（4）研究发现；黄脊竹蝗幼虫在自然状态下感染类产碱假单胞菌后，于24小时后开始死亡，72小时达到死亡高峰，染病后出现行动迟缓，伴有轻微痉挛的现象。为验证此菌是蝗虫致死的原因，该研究小组成员从病死虫尸中提取并分离得到该菌，并用该菌_________________，观察到的现象是___________________。

Answer

牛肉膏、蛋白胨 先调pH，后灭菌 高压蒸汽灭菌锅 防止皿盖上凝结的水珠滴落到培养基上造成污染 临时保藏 保存的时间不长，菌种容易被污染或产生变异 感染生理状况良好的黄脊竹蝗幼虫 感染后的幼虫出现行动迟缓，伴有轻微痉挛现象

【解析】

1、培养基的成分包括碳源、氮源、水和无机盐。

2、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：其基本过程为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板五个步骤。

3、菌种的保藏：甘油管藏法和临时保藏

（1）牛肉膏蛋白胨培养基中，为微生物提供碳源的是牛肉膏和蛋白胨；配制培养基需要先调节pH，在灭菌，以防止调节pH过程中引入杂菌；灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法，所以需要用到高压灭菌锅。

（2）为了防止皿盖上凝结的水珠滴落到培养基上造成污染，所以培养皿应倒置培养。

（3）频繁使用类产碱假单胞菌，可以采用临时保藏的方法保存；该方法保存的时间不长，菌种容易被污染或产生变异。

（4）为证明产碱假单胞菌是蝗虫致死的原因，需要从病死虫尸中提取并分离得到该菌，并用该菌感染生理状况良好的黄脊竹蝗幼虫，如果感染后的幼虫出现行动迟缓，伴有轻微痉挛现象，即可证明。