Question

微生物食品检测是通过微生物检验，判断食品加工环境及食品卫生情况，能够对食品被细菌汚染的程度作出正确的评价，为各项卫生管理工作提供依据，目前受到高度关注。请回答下列问题。

方法一：微生物培养法

（1）培养细菌最常用到牛肉膏蛋白胨培养基，其中蛋白胨的作用是______________________。要配置固体培养基一般需加入__________作为凝固剂。

（2）对食品中具有生命活性的微生物进行检测，看其数量是否超标，通常采用的接种方法是___。培养一段时间后，通过对菌落_________________的观察也可初步确定待检样本中的微生物种类。

（3）用上述方法计算每克样品中菌株数的公式为（C/V）×M，其中C代表______________。 若培养结果中，有的菌落连成一片，最可能的原因是________________________（答出一点即可）。

方法二：特殊物质检测法

（4）将待测样品的微生物接种在含有¹⁴C标记的葡萄糖的培养液中，培养一段时间，通过测定生物代谢所产_______（填一种气体）的放射性强度，间接推测待测样品中微生物的数量。但该方法只适用于部分食品中微生物的检测，理由是___________________________。

Answer

提供碳源、氮源、维生素等 琼脂 稀释涂布平板法 形状、颜色、大小、隆起程度等 某个稀释度下平板上生长的平均菌落数 接种的菌液浓度过高 CO2 有的微生物不利用葡萄糖；有的微生物氧化分解葡萄糖的同时不产生气体等

【解析】

牛肉膏蛋白胨培养基属于完全培养基，其中蛋白胨主要提供碳源、氮源、维生素。微生物培养中的接种方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法两种，稀释涂布平板法相比较于平板划线法可以计数。

（1）牛肉膏蛋白胨培养基，其中蛋白胨的作用是提供碳源、氮源、维生素；若要配置固体培养基一般要加入凝固剂琼脂；
（2）若要对微生物进行计数，一般选择的接种方法为稀释涂布平板法；待长出菌落以后，一般通过菌落的形状、颜色、大小、隆起程度等特征进行初步辨认；
（3）用稀释涂布平板法进行计数时，常常需要数出平板上长出的菌落数，一般一个菌落表示一个活细胞，再比上滴加到平板的体积后乘稀释倍数，所以C表示的是某个稀释度下平板上生长的平均菌落数；若平板上菌落连成一片，没有分散成单个菌落，很可能是因为接种的菌液浓度过高；
（4）微生物以葡萄糖为代谢底物，分解葡萄糖释放二氧化碳，因此可以通过测定生物代谢所产生的二氧化碳的放射性强度，间接推测待测样品中微生物的数量；但对于不利用葡萄糖的微生物，或者分解葡萄糖后不产生二氧化碳的微生物是无法用该方法检测的。