传统单克隆抗体大多是鼠源性(利用骨髓瘤细胞与小鼠B淋巴细胞融合产生)的,而鼠源性单克隆抗体应用于人体治疗时存在诸多问题,因此,全人源化抗体(将人类抗体基因转移到抗体基因缺失的动物中,使该动物表达人类抗体)成为单克隆抗体研究的重点。请回答下列问题:
(1)传统单克隆抗体的制备过程中,获取B淋巴细胞前需要给小鼠______________________。骨髓瘤细胞通常由细胞培养而来,培养过程中细胞生长到一定数量时,该类细胞不会出现__________________________现象。
(2)传统单克隆抗体制备过程中至少有两次筛选,其中第二次是筛选出__________________________、此时获得的杂交瘤细胞若放入小鼠体内进行培养,可从____________________________中提取单克隆抗体。
(3)与一般抗体相比,全人源化单克隆抗体的优点有______________________________(答出两点)等。
(4)制备单克隆抗体的过程中,运用了______________________________和动物细胞培养等技术,而后者需要置于95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养,其中CO2的作用是_______________。
马铃薯卷叶病毒是由蚜虫传播的病原体,与马铃薯有性杂交不亲和的野生种对卷叶病毒有很高的抗性。利用植物体细胞杂交技术可提高马铃薯对卷叶病毒的抗性,具体过程如下图所示。请回答下列问题:
(1)马铃薯细胞和野生种细胞融合前,要先除去细胞壁,其原因是_______________,使用纤维素酶和_______________酶去除细胞壁利用了酶的_______________特点。
(2)③过程可用化学试剂_______________处理或用_______________法来诱导原生质体融合。
(3)④过程表示_______________的过程,⑤⑥过程分别是_______________、_______________。
赖氨酸是人体必需氨基酸,具有促进人体发育、增强免疫的功能,并能起到提高中枢神经组织功能的作用。某农科所的科技人员欲通过将玉米种子的某种蛋白酶改造成“M酶”,从而大大提高玉米种子中赖氨酸的含量,以培育出高赖氨酸的玉米新品种。请回答下列问题:
(1)科技人员先从“提升玉米种子中赖氨酸的含量”这一功能出发,设计预期的“M酶”的_______________,再推测出相对应的目的基因的_______________序列,最终合成出“M酶”基因。
(2)科技人员获得“M酶”基因后,常利用PCR技术在体外将其大量扩增,此过程需要一种特殊的酶是________________,原料是_______________。
(3)“M酶”基因只有插入__________,才能确保“M酶”基因在玉米细胞中得以稳定遗传。
(4)依据每个生物细胞都具有___________的原理,可将含有“M酶”基因的玉米细胞培育成转“M酶”基因的玉米植株。为了确保育种成功,科技人员需要通过测定玉米种子中_______________的含量,从____________水平加以鉴定。
将正确的基因导入细胞以替代错误的突变基因是目前基因治疗的一种重要形式;也可借助基因编辑技术直接修复错误的基因进行基因治疗。请回答下列相关问题:
(1)将正确的基因导入细胞,其核心是构建____________________。下图为进行这一核心过程的案例,该过程中需选择____________________限制酶进行酶切。
(2)如果仅已知目的基因首尾两端的部分核苷酸序列,通常可根据该基因首尾两端的已知脱氧核苷酸序列设计并合成__________,利用__________技术得到大量目的基因。
(3)为鉴定上图所示3种连接方式形成的载体,选择HpaⅠ酶和BamHⅠ酶对其进行双酶切,并对酶切后的DNA片段进行电泳分析。若出现7300bp和200bp的两种条带,则所鉴定的是__________载体;若出现__________,则所鉴定的是载体自连载体。
(4)CRISPR/Cas9基因编辑技术可简单、准确地进行基因定点编辑:根据目的基因的部分序列设计向导RNA,向导RNA与目的基因结合后,就会引导Cas9蛋白结合于目的基因的特异性位点并进行切割,从而介导基因添加、基因删除、基因校正等。向导RNA与目的基因的结合遵循__________原则,Cas9是一种__________酶。
科学家借用慢病毒将正常的血红蛋白基因导入患者的造血干细胞,再将“纠正”基因后的造血干细胞回输至患者体内,使其体内部分造血干细胞能长期合成正常的血红蛋白,达到治疗镰刀型细胞贫血症的目的。请回答下列问题:
(1)镰刀型细胞贫血症是血红蛋白基因的某一处序列CCTGAGG突变为CCTGTGG而导致的一种疾病。MstⅡ酶能识别并切割序列CCTGAGG,用MstⅡ酶处理异常的血红蛋白基因可得到3个DNA片段,那么用MstⅡ酶处理正常的血红蛋白基因会得到________个DNA片段,可见该酶________(填“能”或“不能”)用于镰刀型细胞贫血症的基因诊断。
(2)要利用逆转录的方法合成血红蛋白基因,应从早幼红细胞中提取_________,在__________酶的作用下合成cDNA;与细胞中的血红蛋白基因相比,合成的cDNA没有__________、__________和内含子等。
(3)在构建能导入造血干细胞的含血红蛋白基因的表达载体过程中,以____________作为工具酶,以__________作为载体。
(4)题干所述的基因治疗方法属于___________(填“体内”或“体外”)基因治疗。
下列有关叙述错误的是( )
A.基因探针与转基因细胞的基因组DNA杂交后,若显示出杂交带,则表明目的基因导入成功
B.植物体细胞杂交过程中,杂种细胞形成细胞壁标志着原生质体融合成功
C.利用体细胞杂交技术培育出了白菜-甘蓝,说明白菜与甘蓝不存在生殖隔离
D.若在卵细胞膜与透明带之间观察到了两个极体,则标志着卵母细胞已受精