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阅读以下资料,回答有关基因工程的问题:

资料甲:1973年,博耶(HBoyer)和科恩(S Cohen)选用仅含单一EcoR I酶切位点的载体质粒pSC101,使之与非洲爪檐核糖体蛋白基因的DNA片段重组。重组的DNA转入大肠杆菌DNA中,转录出相应的mRNA。至此,基因工程正式问世。

资料乙:1980年, 科学家首次培育出世界上第一个转基因小鼠;1983年科学家又培育出了第一例转基固烟草。

1)资料甲中实验不仅证明了重组DNA可以进入受体细胞,还能证明外源基因可以在原核细胞中成功_______,并实现物种之间的_______

2)资料乙培育转基因烟草用农杆菌感染时,应优先选用烟草_______ (填“受伤的”或“完好的”)叶片与含重组质粒的农杆菌共同培养,选用这种叶片的理由是_________________________

3)基因工程中目的基因主要从基因文库中获取,如果基因__________________,还可以通过人工合成方法得到,再利用PCR技术扩增。若一个目的基因经过PCR扩增4次,则需要_______个引物。

4)蛋白质工程也被称为第二代基因工程,其基本途径是:从______出发设计预期的蛋白质结构_____找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)。

 

表达(转录) 基因交流 受伤的 叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质,可吸引农杆菌移向这些细胞 比较小,序列又已知 30 预期的蛋白质功能 推测应有的氨基酸序列 【解析】 基因工程技术的基本步骤:(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 (1)将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达,说明体外重组的质粒可以进入受体细胞,真核生物基因可在原核细胞中表达,实现了物种之间的基因交流。 (2)用农杆菌感染时,应优先选用烟草受伤的叶片与含重组质粒的农杆菌共同培养,选用这种叶片的理由是:叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质,可吸引农杆菌移向这些细胞。 (3)当基因比较小,核苷酸序列又已知,则可以直接通过人工合成的方法获取目的基因。1个目的基因扩增一次需要2个引物,扩增两次需要2+4=6个引物,扩增三次需要2+4+8=14个引物,扩增四次需要2+4+8+16=30个引物。 (4)蛋白质工程的基本途径是:从预期蛋白质的功能出发→设计预期蛋白质的结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。
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考点分析:
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人畜粪便中含有大量的大肠杆菌,人们常用大肠杆菌作为判断自来水是否被粪便污染的指示菌,我国规定1000mL自来水中的大肠杆菌数不得超过3个。环境监测部门利用滤膜法对某河流水体进行了大肠杆菌活菌数目的测定。请回答下列问题:

1)培养大肠杆菌,人们常用LB培养基,其配方是:蛋白胨10g、酵母膏5g、氯化钠10g,将上述物质溶解后用蒸馏水定容至1000mL,调节pH7。该培养基中为细菌提供碳源的物质是_______,对该培养基灭菌通常采用的方法为__________________

2)为了便于统计水体中活菌的数目,常常将水样进行稀释。如果要得到101倍的稀释液可以取水样1 mL加入无菌水________mL 制成,并依次制备系列梯度的稀释液。每个稀释倍数的菌液取10 mL进行过滤,然后将滤膜放置在固体培养基上。为了_______,稀释、过滤和旋转滤膜等操作都应该在酒精灯火焰附近进行。

3)将放有滤膜的平板在适宜条件下培养,每隔12 h统计一次菌落数目,应选取菌落数目________时的记录作为结果。如果经过培养后稀释倍数为1025个平板上菌落数分别为2127353745,那么每升河水中约含大肠杆菌_______个。用这种方法测定的细菌数量比实际活菌数量要_______,这是因为_______

 

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倒春寒是指初春气温回升比较快,但到了春季将要结束时,却又突然降至低温的一种气温变化现象。倒春寒来袭时,对人们的身体健康和日常生活都会造成不利影响。请回答下列相关问题:

1)倒春寒来袭时,在户外我们感到寒冷,是因为低温刺激冷觉感受器时,受刺激部位的膜电位变为_________,产生的神经冲动传到下丘脑,再经下丘脑传入__________________形成冷觉。

2)人在饥饿时遇到倒春寒来袭,会表现出面色苍白,全身颤抖。这时血糖浓度______;细胞产热不足以维持正常体温,会通过_______方式加速热量的产生,所以全身颤抖;另一方面通过______方式,减少热量的散失,所以面色苍白。

3)气温骤降时病毒更易侵入人体,引发疾病,通常可以通过注射疫苗达到预防疾病的目的。为确定某病毒疫苗的免疫效能及有效浓度,科研人员进行了如下实验:

①将健康的实验动物分成对照组和多个实验组,每组若干只动物。

②对照组的处理:接种不含疫苗的接种物,一段时间后________

实验组处理:___________________

③观察、统计各实验组和对照组动物的发病率。结果预测:若实验组比对照组发病率_______ 则说明该疫苗有免疫效能,再根据发病状况,进一步确定该疫苗的有效浓度。

 

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中国科学院亚热带农业生态研究所培育出巨型稻(又名姚明稻)新品种,经实验证明,巨型稻采用“巨型稻青蛙泥鳅”共生的生态种养模式,生态效益显著增加。下图是种植巨型稻的农田生态系统碳元素转移示意图,箭头和字母分别表示碳元素的传递方向和转移量。请回答下列相关问题:

1)在该群落中,水稻、杂草、藻类分别占据了不同的空间,这种结构显著提高了_____,在巨型稻的生长期,该生态系统abcd碳元素转移量的关系为____________

2)为调某正方形稻田的虫害发生状况,可采用_______法进行随机取样;对于稻田中有趋光性的昆虫,通常用______的方法调查它们的种群密度;在进行土壤中小动物类群丰富度的研究时,常用_______法进行采集、调查。

3)“稻花香里说丰年,听取蛙声一片”。在青蛙的繁殖季节,雄蛙通过叫声这种______信息求偶,这种信息传递对青蛙具有的意义是_____________

4)氮元素在生物群落和无机环境之间是不断循环的,但稻农还要往稻田中不断施加氮肥,原因是:____________________

 

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下列有关生物技术安全性与伦理问题的叙述,错误的是(   

A.生物技术既可造福人类,也可能在使用不当时威胁社会

B.食用转基因食品会导致外源基因转入人体细胞

C.我国禁止生殖性克隆人,但不反对治疗性克隆

D.生物武器传染性强、作用范围广,应严格禁止

 

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试管婴儿技术,包括超数排卵、取卵(精子)、体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植等相关技术。下列有关叙述错误的是(   

A.使用一定的激素才能实现超数排卵

B.采集的精子经获能处理后才能进行受精

C.体外受精后,应将受精卵移入发育培养液中继续培养

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