Question

白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将人白细胞介素的基因导入到酵母菌细胞中，使其分泌出有活性的白细胞介素。请据图回答下列问题：

（1）白细胞介素基因进入酵母菌细胞内，并且在其细胞内维持稳定和表达的过程，称为_______________。在表达过程中，启动子需与_______________识别和结合，从而驱动转录过程。

（2）要检测白细胞介素的基因是否进入受体细胞，常用的方法是_______________法；要检测白细胞介素的基因在受体细胞内是否翻译出蛋白质，需用________________法。

（3）在体液免疫过程中，白细胞介素是由_______________细胞分泌的，为了能成功表达出白细胞介素，不使用细菌，而使用酵母菌细胞作为受体细胞，可能原因是_______________。

（4）在分泌型表达载体和白细胞介素基因所在DNA分子上均有多个限制酶的酶切位点，图示过程获得有效表达的重组载体使用了EcoRⅠ和EcoR 52两种限制酶，与使用单一的限制酶相比，其优点是______________________________。

Answer

转化 RNA聚合酶 DNA分子杂交 抗原-抗体杂交 T淋巴 细菌细胞中无内质网和高尔基体等加工白细胞介素的细胞器 能防止目的基因、表达载体发生自身环化或者目的基因反向接入分泌型表达载体中

【解析】

要将人白细胞介素的基因导入到酵母菌细胞中，即目的基因为白细胞介素的基因，受体细胞为酵母菌细胞。图示为目的基因和载体用EcoRI和EcoR52酶切后连接成重组载体的过程。

（1）将目的基因——白细胞介素基因进入酵母菌细胞内，并且在其细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化。在表达过程中，启动子需与RNA聚合酶识别和结合，从而驱动转录过程。

（2）要检测白细胞介素的基因是否进入受体细胞，检测的是DNA，方法是DNA分子杂交法；要检测白细胞介素的基因在受体细胞内是否翻译出蛋白质，需用抗原-抗体杂交法。

（3）在体液免疫过程中，白细胞介素是由T淋巴细胞分泌的。细菌为原核细胞，无内质网和高尔基体等细胞器，无法对蛋白质进行加工。

（4）使用不同的限制酶切割目的基因（载体）的两端，可以能防止目的基因、表达载体发生自身环化，或者目的基因反向接入分泌型表达载体中。