某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。下列说法错误的是（ ）
A.分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是泡菜滤液中菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落
B.推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有鉴别乳酸菌和中和乳酸
C.分离纯化时应挑选出具有透明圈的菌落作为候选菌
D.乳酸菌在-20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的液氮
硝化细菌、醋酸菌、乳酸菌、酵母菌的代谢类型依次是（ ）
①自养需氧型 ②自养厌氧型 ③异养需氧型 ④异养厌氧型 ⑤异养兼性厌氧型
A.①②④⑤ B.①④④⑤
C.②③②⑤ D.①③④⑤
如图是利用酵母菌和醋酸菌制作果酒和果醋的装置示意图，以下说法正确的是（ ）
A.酵母菌和醋酸菌在细胞结构上的最主要区别是细胞壁的成分不同
B.果酒发酵中期通入氮气，酵母菌将从有氧呼吸转变为无氧呼吸
C.制作果醋时应将开关2关闭
D.长而弯曲的胶管1在发酵过程中只能防止杂菌污染
下列有关果酒制作过程的叙述，正确的是（ ）
A.葡萄汁装瓶前，发酵瓶要用70%的酒精进行灭菌
B.在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌
C.果汁发酵后发酵液略显酸性不利于酵母菌的生长繁殖
D.应选择新鲜的葡萄，先除去葡萄的枝梗，再进行冲洗
为调查某地土质状况，科研小组对该地土壤中分解尿素的细菌进行了分离和纯化培养。请回答下列问题：
（1）培养基的常用灭菌方法是______________________________，倒平板时培养基的温度不能太低，原因是______________________________。
（2）该研究小组将10g土样进行梯度稀释，在某个稀释度下涂布接种了3个平板（接种量均为0．1mL），经适宜培养后，3个平板均没出现菌落，分析可能的原因是________________。分析原因后，科研小组用先前制作的未使用的平板重新涂布接种完成实验，在另外某个稀释度下涂布接种的3个平板，经适宜培养后均存在多种不同特征的菌落，推测最可能的原因是_______________。
（3）科研小组从同一平板中挑选出A、B、C三种菌落进行梯度稀释并分别涂布接种在分解尿素的细菌的选择培养基上，经适宜培养后，均能检测到A、B菌落却始终检测不到C种菌落。由此可得出的结论是____________________。推测C种细菌与A、B在同一个平板上能生长繁殖的可能原因是______________________________。
（4）在实验中，研究者每隔24小时统计一次菌落数目，并选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止______________________________。
由腊梅凝集素基因控制合成的某种蛋白质能与蚜虫肠道黏膜上的受体结合，从而抑制蚜虫吸收营养物质。通过基因工程将腊梅凝集素基因转入烟草，可增强其抗蚜虫的能力。请回答下列问题：
（1）以腊梅凝集素基因产生的mRNA作为模板，在_______________酶的作用下，按照_______________原则获得cDNA片段，以获取目的基因。
（2）为增加目的基因的数目，可用PCR技术进行扩增。PCR扩增之前，需要设计一对与目的基因两端序列互补配对的引物，若根据腊梅凝集素基因控制合成的蛋白质的氨基酸序列设计引物，引物的序列可以有多种，原因是_______________。
（3）在PCR反应体系中，除具备缓冲液、模板DNA分子和引物外，还应有_______________。
（4）将目的基因导入烟草细胞常用的方法是农杆菌转化法。农杆菌的Ti质粒上的T-DNA具有________________________的特点。在该过程中需要添加酚类物质，目的是________________________。
