Question

在缤彩纷呈的生物世界，微生物似乎显得过于微小与沉寂，它们在自然界却作用非凡，很多生命现象都与微生物有着千丝万缕的联系。

（1）幽门螺杆菌是急慢性胃炎的主要致病菌，它能分解尿素，在菌体周围形成一层保护性“氨云”，中和胃酸，定植致病。将患者体内采集的样本制成菌液，培养在以尿素为唯一氮源的___________（填“选择”或“鉴别”）培养基上进行“浓缩”。与固体培养基相比，液体培养基更适于“浓缩”培养的原因是___________。若培养基中加入酚红指示剂，则该菌落周围会出现__________环带，这与菌体内____________的作用密切相关。

（2）大肠杆菌数目是否超标可以作为食品卫生和水源污染度的检测指标，大肠杆菌的数目可以通过滤膜法来测定：将一定体积的样品过滤后，将滤膜放在添加__________试剂的培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现___________色，根据该菌落的个数判定饮用水是否污染。

（3）分离纯化大肠杆菌最常用的方法是___________和__________，如图为连续划线法示意图，在图中___________（填图中序号）区域更易获得单菌落，原因是_______________________________。

Answer

选择 培养基与菌体接触充分，菌体繁殖快（或“培养基与菌体接触充分，菌体更易得到较多营养物质”） 红色 脲酶 伊红美蓝 黑 平板划线法 稀释平板涂布法 ③ ③处稀释程度最高

【解析】

细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素；伊红——美蓝培养基常用来鉴别大肠杆菌，其原理是大肠杆菌能分解乳糖产生大量的混合酸，菌体带H+，故菌落被染成深紫色，从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽。

（1）用培养基对某种微生物进行“浓缩”的原理是：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长，即配置选择培养基。所以应将患者体内采集的样本制成菌液，培养在以尿素为唯一氮源的选择培养基上进行“浓缩”。与固体培养基相比，液体培养基与菌体接触充分，菌体繁殖快（或“培养基与菌体接触充分，菌体更易得到较多营养物质”），所以液体培养基更适于“浓缩”培养；尿素分解菌可以产生脲酶使尿素被分解成氨，可使pH呈碱性，从而使添加酚红指示剂的鉴别培养基上的菌落周围会出现红色环带，所以培养基中加入酚红指示剂，若该菌落周围岀现红色环带，说明菌体内含有脲酶。

（2）鉴别大肠杆菌的试剂为伊红美蓝试剂，能使大肠杆菌的菌落呈现黑色。

（3）分离纯化大肠杆菌最常用的方法是平板划线法和稀释平板涂布法，图中所示为平板划线法分离纯化大肠杆菌，在图中③区域更易获得单菌落，原因是③区域是划线结束处，③处稀释程度最高。