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噬菌体展示技术是将外源蛋白或多肽的DNA序列插入噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置...

噬菌体展示技术是将外源蛋白或多肽的DNA序列插入噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使外源基因随噬菌体外壳蛋白基因的表达而表达,同时,外源蛋白或多肽随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。利用该技术可以获得单克隆抗体(最新技术)。请回答下列问题:

1)传统单克隆抗体的获得需先对小鼠进行_________处理,整个过程中需要进行两次筛选,目的分别是__________________

2)噬菌体展示技术获得的抗体还可用于定量检测抗原,如双抗体夹心法,具体原理如下图所示:

分析上图可知,固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合,这是由于不同抗体可与同一抗原表面的_________结合。该检测方法中,酶标抗体的作用是__________,可通过测定产物量来推测抗原量。

3)单克隆抗体最广泛的用途是___________

 

注射特定的抗原蛋白(免疫) 筛选出杂交瘤细胞 筛选出产生单克隆抗体的杂交瘤细胞 )不同部位(不同受体) 与待测抗原结合,催化待定底物反应 用作体外诊断试剂 【解析】 题图分析,固相抗体和抗原特异性结合,再与酶标抗体结合,催化特定底物形成检测产物。 单克隆抗体的制备过程的细节:(1)二次筛选:①筛选得到杂交瘤细胞(去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞);②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。 (2)细胞来源:B淋巴细胞:能产生特异性抗体,在体外不能无限繁殖;骨髓瘤细胞:不产生专一性抗体,体外能无限繁殖。 (3)杂交瘤细胞的特点:既能大量增殖,又能产生特异性抗体。 (1)传统单克隆抗体的获得需先对小鼠进行注射特定的抗原蛋白(免疫)处理,使其产生已免疫的B淋巴细胞;整个过程中涉及的现代科学技术有动物细胞融合(已免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合)、动物细胞培养(体内培养和体外培养)。该过程中有两次筛选,分别是筛选出杂交瘤细胞、筛选出产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。 (2)分析上图可知,不同抗体可与同一抗原表面的不同部位结合,因此固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合。该检测方法中,酶标抗体的作用是与待测抗原结合,酶催化检测底物反应,可通过测定产物量来推测抗原量。 (3)单克隆抗体具有纯度高,产量高、特异性强的特点,用作体外诊断试剂是单克隆抗体最广泛的用途。
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考点分析:
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乳头瘤病毒(HPV,为DNA病毒)可导致人患宫颈癌,科研人员将HPV某外壳蛋白A基因构建成表达载体,经包装或直接注入体内,表达出相应抗原,诱导机体产生免疫反应。该方法获得的疫苗称为DNA疫苗。请回答下列问题:

1)获取A基因的方法:

①方法一:提取HPVDNA,利用PCR技术扩增A基因。PCR技术的前提是:____________,以便合成引物。PCR扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏_________的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关,长度相同但___________的引物需要设定更高的退火温度。如果PCR反应得不到任何扩增产物,则可以采取的改进措施有_____(填序号:①升高退火温度  ②降低退火温度  ③重新设计引物)。

②方法二:从宿主细胞中提取总RNA,以与__________________互补的一段单链DNA作为引物,加入___________酶获得cDNA,然后经PCR扩增获得大量的A基因。

2)在基因工程的基本操作程序中,利用PCR技术扩增目的基因后,需要进行_____________,其目的是__________。该过程中常用不同的限制酶切割质粒与目的基因,其具备的优势是___________________

 

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在缤彩纷呈的生物世界,微生物似乎显得过于微小与沉寂,它们在自然界却作用非凡,很多生命现象都与微生物有着千丝万缕的联系。

1)幽门螺杆菌是急慢性胃炎的主要致病菌,它能分解尿素,在菌体周围形成一层保护性“氨云”,中和胃酸,定植致病。将患者体内采集的样本制成菌液,培养在以尿素为唯一氮源的___________(填“选择”或“鉴别”)培养基上进行“浓缩”。与固体培养基相比,液体培养基更适于“浓缩”培养的原因是___________。若培养基中加入酚红指示剂,则该菌落周围会出现__________环带,这与菌体内____________的作用密切相关。

2)大肠杆菌数目是否超标可以作为食品卫生和水源污染度的检测指标,大肠杆菌的数目可以通过滤膜法来测定:将一定体积的样品过滤后,将滤膜放在添加__________试剂的培养基上培养,大肠杆菌的菌落呈现___________色,根据该菌落的个数判定饮用水是否污染。

3)分离纯化大肠杆菌最常用的方法是_____________________,如图为连续划线法示意图,在图中___________(填图中序号)区域更易获得单菌落,原因是_______________________________

 

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天津独流老醋历史悠久、独具风味,其生产工艺流程如下图。

1)酒精发酵阶段,需添加酵母菌。在操作过程中,发酵罐先通气,后密闭。通气的作用是______________

2)醋酸发酵阶段,独流老醋采用独特的分层固体发酵法,发酵30天。工艺如下:


 

①发酵过程中,定期取样测定醋酸杆菌密度变化。与颠倒前相比,B层醋酸杆菌在颠倒后密度变化的特点是_________

②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因。发酵过程中,发酵缸中_________层醋醅有利于乳酸菌繁殖,积累乳酸。

③为检测发酵过程中乳酸菌的含量,取不同稀释度的样品各01mL涂布到固体培养基上,在适宜条件下培养一段时间,统计得到106107108三个稀释度的培养基上的平均菌落数依次为317个、125个、16个,据此估算,每毫升样品中的乳酸菌数约为_________个。上述统计的菌落数往往比活菌的实际数目_________,原因是____________________________________

 

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“金山银山不如绿水青山”。当前在城市建设中,应更加注重生态环境的建设。如图所示为利用人工建立的湿地公园对生活污水进行净化处理,形成的人工湿地污水净化系统。下列叙述正确的是(   

A.生态工程建设的目的只是防止环境污染

B.人工湿地中的芦苇属于挺水植物,绿藻属于浮游植物,黑藻属于沉水植物,这一现象体现了群落具有水平结构

C.在人工湿地中有“1+1>2”的效果,“1+1>2”所体现的是系统整体性原理

D.该人工湿地系统中的总能量来自于植物固定的太阳能的总量

 

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在动物胚胎发育过程中,早期原肠胚的细胞从一个部位移植到另一部位时,被移植的细胞能适应新的部位并参与那里的器官形成,但如果在原肠胚的末期,把未来发育为蝾螈后肢的部分移植到另一蝾螈胚胎不长后肢的部位,将发育为一条额外的腿,这说明(

A.原肠胚末期已出现了组织分化和器官的形成

B.原肠胚末期出现了细胞分化

C.细胞是全能的

D.原肠胚已出现了三个胚层

 

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