Question

某同学用牛肉膏蛋白胨培养基培养和纯化大肠杆菌。请回答下列相关问题：

（1）制备牛肉膏蛋白胨培养基过程中，加入琼脂，加热使其溶化，培养基的pH调制到________（填“7.2”“10.2”或“5.2”）左右，根据物理性质分，该培养基属于_________培养基。

（2）配制好的培养基用_________________方法进行灭菌；该同学在实验室正准备进行倒平板操作时，突然感到身体不适要去校医院看医生，该同学如何处理这正准备倒平板的培养基？（实验室有冰箱、高压锅、恒温箱等器具）___________。

（3）微生物的接种方法有多种，虽每种技术操作方法各不相同，但其核心都是_________。

（4）该同学用稀释涂布平板法将某稀释度的菌液涂布多个平板，在适宜的条件下分别培养2天后，观察菌落的____________（答出两点即可），若平板上菌落特征有明显的差异，可能是培养基灭菌不彻底，如何设计实验来检验？________________。

Answer

7.2 固体 高压蒸汽灭菌 放到0-4℃冰箱中，避光保存 防止杂菌污染 大小、颜色、隆起程度 在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养了一段时间，观察培养基表面是否出现菌落

【解析】

1、伊红为酸性染料，美蓝为碱性染料，大肠杆菌在伊红美蓝培养基的菌落呈深紫色（黑色），并有金属光泽，伊红美蓝是专一鉴别大肠杆菌的指示剂。

2、常用的纯化微生物时的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。

（1）培养细菌的pH调整到中性或微碱性，故7.2最适宜，由于培养基中含有琼脂，故该培养基属于固体培养基。

（2）培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌，若该同学在实验室正准备进行倒平板操作时，突发急事，应将培养基放到0-4℃冰箱中，避光保存。

（3）微生物的接种方法有多种，虽每种技术操作方法各不相同，但其核心都是防止杂菌污染。

（4）菌落的的观察，一般观察其形态特征，如大小、颜色、隆起程度等，验证培养基灭菌是否合格，可在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养了一段时间，观察培养基表面是否出现菌落。