Question

为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因C（图1），拟将其与质粒（图2）重组，再借助农杆菌导入菊花中。下列操作与实验目的不相符的是（    ）

选项	实验操作	实验目的
A	将EcoR I酶、DNA连接酶、含基因C的DNA片段和质粒混合	构建含基因C的重组质粒
B	用含基因C的农杆菌侵染菊花愈伤组织	将基因C导入菊花细胞
C	在培养基中添加卡那霉素	筛选出被成功转化的菊花细胞
D	用DNA分子杂交技术检测基因C	鉴定基因C是否整合到菊花染色体上

A.A B.B C.C D.D

Answer

C

【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

A、根据目的基因两侧限制酶的种类可知，构建基因表达载体时需要的限制酶是EcoRⅠ酶，即构建基因表达载体时需要将EcoRⅠ酶、DNA连接酶、含基因C的DNA片段和质粒混合，A正确；

B、根据题干信息可知将该目的基因导入植物细胞时采用的是农杆菌转化法，即含基因C的农杆菌侵染菊花愈伤组织，B正确；

C、由图可知，标记基因是潮霉素抗性基因，因此要筛选出被成功转化的菊花细胞，应该在培养基中添加潮霉素，C错误；

D、检测目的基因是否插入受体细胞的染色体上时采用的是DNA分子杂交技术，D正确。

故选C。