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大肠杆菌是寄生于人肠道内的一种细菌,其代谢产物能与染料伊红美蓝反应而使菌落呈紫黑...

大肠杆菌是寄生于人肠道内的一种细菌,其代谢产物能与染料伊红美蓝反应而使菌落呈紫黑色。测定水样是否符合饮用水的卫生标准,常用滤膜法测定大肠杆菌的总数。滤膜法的大致流程如下图1所示。请回答下列问题:

1)据题意分析,图中培养基除了加入水、碳源、氮源和无机盐为大肠杆菌生长繁殖提供营养物质外,还需添加_______________和伊红美蓝。

2)获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵,本实验中所使用的培养皿等玻璃器皿的常用灭菌方法有_____________

3)在无菌操作条件下,将10 mL待测水样加入到90 mL无菌水中,稀释后的菌液通过滤膜法测得伊红美蓝培养基上的菌落数平均为124个,紫黑色菌落数平均为29个,推测1L待测水样中的大肠杆菌总数约为____________个。

4)若饮用水中大肠杆菌超标,可引发多种感染。为了研究不同浓度的甲抗生素对AB两种大肠杆菌的抑菌效果,做如下实验。   

I.取稀释后的AB两种大肠杆菌菌液少许,分别与溶化并冷却至45℃左右的培养基混匀后倒平板各5个;

II.待平板凝固后,在每个平板中央的培养基里各打一个直径为3mm的孔,并在孔中分别加入不同浓度的甲抗生素

III.在适宜条件下培养一段时间,可在孔的周围观察到一圈清晰区,按图2所示测量清晰区的直径,数据如下表。

甲抗生素浓度/µg/mL

50

75

100

150

200

清晰区直径/mm

A大肠杆菌

5

8

13

17

B大肠杆菌

5

7

9

14

19

 

①由表1数据可知,甲抗生素对AB大肠杆菌的增长都有抑制作用,但_______大肠杆菌对甲抗生素敏感性较强。判断依据是_____________

②为了更准确地说明清晰区的出现是因为甲抗生素的作用,本实验还需增设一组在上述平板孔内加入 _____________作为对照。

本实验需将上述接种后的平板与_______________在相同条件下培养,以检查培养基灭菌是否合格以及培养过程中是否受到杂菌污染。

 

琼脂(或凝固剂) 干热灭菌法(或高压蒸汽灭菌) 2900 B 在甲抗生素浓度为5μg/mL时,B大肠杆菌平板孔的周围出现清晰区,而A大肠杆菌平板孔的周围没有出现清晰区 等量的无菌水 未接种的培养基(或未接种的平板) 【解析】 (1)据题意分析,图中培养基为固体培养基,除了加入水、碳源、氮源和无机盐为大肠杆菌生长繁殖提供营养物质外,还需添加琼脂和伊红美蓝。 (2)微生物实验中培养皿等玻璃器皿的灭菌常采用高压蒸气灭菌法或干热灭菌法。 (3)大肠杆菌的代谢产物能与染料伊红美蓝反应而使菌落呈紫黑色,这说明紫黑色菌落数即为大肠杆菌菌落数,10mL待测水样中大肠杆菌菌落数平均为29个,则1L待测水样中的大肠杆菌总数约为29×100=2900个。 (4)①由表中数据可知,甲抗生素对A、B大肠杆菌的增长都有抑制作用,但B大肠杆菌对甲抗生素敏感性较强。判断依据是在甲抗生素浓度为5μg/mL时,B大肠杆菌平板孔的周围出现清晰区,而A大肠杆菌平板孔的周围没有出现清晰区。 ②为了更准确地说明清晰区的出现是因为甲抗生素的作用,本实验还需增设一组在上述平板孔内加入等量的无菌水作为对照。 ③本实验需将上述接种后的平板与或未接种的平板在相同条件下培养,以检查培养基灭菌是否合格以及培养过程中是否受到杂菌污染。
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考点分析:
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