Question

结核病是由结核分枝杆菌引起的传染病。请回答下列问题：

（1）研究者从患者体内提取病原菌进行分离培养。培养结核分枝杆菌的培养基主要含有天门冬氨酸、甘油、鸡蛋黄、KH₂PO₄、MgSO₄等。此培养基成分中既能作为氮源又能提供特殊的营养物质的是______________________。

（2）为探究不同抗生素对结核分枝杆菌的抑菌效果，取细菌培养液2滴涂布于固体培养基上，然后将浸有相同浓度不同种类的抗生素圆纸片置于培养基表面，37 ℃培养4周，实验结果如甲图，其中圆纸片A、B分别浸过抗生素A和抗生素B，圆纸片C浸过抗生素A、B的混合物。乙图是该菌结构示意图，图中箭头表示不同抗生素的作用位置。

①欲得到甲图实验结果，接种过程用到的实验器材有______________________ (至少写出两个)。

②实验中圆纸片D用作实验对照，对圆纸片D的处理方法是______________________。

③实验结果说明，圆纸片周围清晰区______________________ (“越大”或“越小”)，抗菌效果越好。结合图乙分析，圆纸片C周围清晰区大于圆纸片A和B的原因是____________________________ 。

Answer

天门冬氨酸、鸡蛋黄 涂布器、移液管、酒精灯 浸泡等量的无菌水 越大 圆纸片C中含抗生素A和B，A作用于细菌细胞壁，有利于B进入细胞发挥作用，两者联合提高了杀菌效果

【解析】

1、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因为它们来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物种和氧气的要求。2、微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）此培养基成分中既能作为氮源又能提供特殊的营养物质的是天门冬氨酸和鸡蛋黄，天门冬氨酸的结构式为HOOC-CH2-CH（NH2）-COOH，含氮元素能够作为氮源，同时它还能作为特殊的营养物质给培养基提供养分，鸡蛋黄中含有丰富的脂肪和维生素不仅能提供氮源还能为培养基提供特殊的营养物质，而甘油的化学结构式为C3H8O3，它和KH2PO4、MgSO4均不含氮元素，无法作为氮源，甘油能作为碳源，KH2PO4、MgSO4是无机盐。

（2）①有题干信息可知，实验中采用的接种方法是稀释涂布法，稀释涂布法的操作中需要用涂布器进行涂布，而样品的吸取需要移液管或者移液枪，实验中需要在酒精灯旁进行无菌操作，故需要用到的实验器材为涂布器、移液管、酒精灯。

②实验中圆纸片D用作实验对照，对圆纸片D的处理方法是浸泡等量的无菌水。微生物实验中不能采用蒸馏水做空白对照，而是采用无菌水，这样才能排除杂菌的实验的影响。

③实验结果说明，圆纸片周围清晰区越大，抗菌效果越好，这是因为圆纸片周围结核分枝杆菌数量越少，抑菌效果越好。由图乙可知抗生素A的作用位点在细菌的细胞壁，抗生素B的作用点在细菌细胞内，圆纸片C周围清晰区大于圆纸片A和B的原因是，圆纸片C中含抗生素A和B，A作用于细菌细胞壁，有利于B进入细胞发挥作用，两者联合提高了杀菌效果，而圆片纸A和B都只采用了单一的抗生素，无法对细菌达到很好的杀灭效果。