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CTAB法是一种提取植物DNA的方法。CTAB是一种阳离子去污剂,能与核酸形成复...

CTAB法是一种提取植物DNA的方法。CTAB是一种阳离子去污剂,能与核酸形成复合物,在高盐(>0.7mol/LNaCl)浓度下可溶,在低盐(0.1-0.5mol/LNaCl)浓度下,复合物就因溶解度降低而沉淀,而大部分的蛋白质及多糖等仍溶解于溶液中。通过有机溶剂抽提,去除蛋白质等杂质后,加入异丙醇获得的沉淀物为CTAB与核酸复合物,用体积分数为75%的乙醇洗涤可去除CTAB。请回答下列问题:

1CTAB提取液中,NaCl浓度为1.4mol/L的目的是_________。步骤4中用体积分数为75%的乙醇洗涤沉淀物的目的是去除_________

2)苹果组织研磨前经液氮冷冻处理,更易于研磨的原因是_________

3)用体积分数为75%的乙醇洗涤后的沉淀物中含有RNA,为得到较为纯净的DNA,可先用_________溶液溶解,然后加入_________酶,然后再重复步骤_________,最后在上清液中加入一定体积的、冷却的_________,可以得到纯净的DNA

 

溶解CTAB与核酸复合物 CTAB 冷冻后的细胞易破碎 2mol/L的NaCl RNA ② 体积分数为95%的乙醇 【解析】 DNA粗提取和鉴定的原理: 1、DNA的溶解性:DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质溶于酒精;DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。 2、DNA的鉴定:在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 DNA粗提取实验材料的选择的原则为:材料易取,DNA含量高,一般动物材料中选择鸡血,植物材料中选择猕猴桃。 (1)根据题干信息“CTAB能与核酸形成复合物,在高盐(>0.7mol/LNaCl)浓度下可溶”所以NaCl浓度为1.4mol/L的目的是溶解CTAB与核酸复合物;题干中的信息“用体积分数为75%的乙醇洗涤可去除CTAB”,所以步骤4中用体积分数为75%的乙醇洗涤沉淀物的目的是去除CTAB。 (2)由于冷冻后的细胞易破碎,所以需要将苹果组织研磨前经液氮冷冻处理。 (3)由于DNA在2mol/L的NaCl溶液中溶解度较大,所以为了得到较为纯净的DNA可以先用2mol/L的NaCl溶液溶解,加入RNA酶,将RNA水解,重复步骤②,由于DNA分子不溶于酒精,而细胞中的其他蛋白质溶于酒精,所以可以加入加入一定体积的、冷却的体积分数为95%的乙醇,得到纯净的DNA。
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径柳匙叶草是一种泌盐植物。科研工作者将径柳匙叶草液泡膜Na+/K+逆向转运蛋白基因(TaNHX2基因)转移到棉花细胞内,获得了转基因耐盐棉花新品种。下图1是获取的含有目的基因的DNA片断,Sau3A IEcoR IBamH I为三种限制酶,图中箭头所指为三种限制酶的切点;图2是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图;图3是土壤农杆菌中用于携带目的基因的Ti质粒结构示意图。请分析回答问题:

1)若图1所示DNA片段是利用径柳匙叶草的DNA直接获得的,则该获取目的基因的方法为__________

2)不能在径柳匙叶草根尖分生区细胞中获得TaNHX2基因的mRNA,其原因是____________________

3)假如用BamH I切割图1所示的DNA片段,获得目的基因,则需选用__________酶切割图3所示质粒,以便构建基因表达载体。该方案的缺陷是____________________。故切割图1所示DNA片段的最佳方案是选用双酶切法。

4)图3中,质粒上抗生素抗性基因的作用是______________________________

5)为了检测技术成果,科研工作者将转基因棉花种植在盐碱地,观察其生长状况,这属于__________水平的检测。

 

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黑腐皮壳菌(一种真菌)感染苹果植株可引发腐烂病。现对该菌进行分离培养和应用的研究,下表是分离培养时所用的培养基配方。请分析回答问题:

物质

马铃薯

葡萄糖

自来水

氯霉素

琼脂

含量

200g

20g

1000mL

03g

20g

 

1)上表培养基配方中,马铃薯可为微生物生长提供____________等营养成分;氯霉素的作用是__________

2)培养基的制备步骤包括计算、称量、溶化、调pH__________、倒平板。等平板冷却凝固后,将平板__________,以防止冷凝水污染培养基。

3)为检测某苹果植株黑腐皮壳菌感染程度,需对该植株患病组织进行病菌计数研究,则应将提取的菌液采用____________________法进行接种。

4)将分离获得的病菌分别接种至含有等量05%苦水碱剂、2%氟硅唑、6%戊唑醇、40%福美砷、清水的培养基中进行抗药性检测实验,结果如下表所示。分析可知,____________________能很好地抑制该病菌的生长,适合防治苹果腐烂病。

小组

05%苦水碱剂

2%氟硅唑

6%戊唑醇

40%福美砷

清水

菌落数目

10

2

3

7

17

 

5)为研究苹果黑腐皮壳菌数量增长规律,研究者将该菌在液体培养基和固体培养基中培养,获得如图所示的生长速率曲线图。图中__________(选填“a”或“b”)曲线表示该菌在液体培养基中的生长曲线。

 

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冰叶日中花是一种原产非洲的植物,长期逆境胁迫下,其光合作用能够从C3途径(卡尔文循环)可以变为CAM途径(如下图1所示)。请回答下列问题:

1)适宜条件下,冰叶日中花通过C3途径进行光合作用,白天气孔处于__________状态,CO2__________结合进入卡尔文循环,卡尔文循环发生的场所是____________________

2)长期在高温、缺水、高盐等逆境胁迫下,冰叶日中花进行CAM途径,白天气孔关闭,CO2来源于____________________。逆境胁迫下进行CAM途径的意义是______________________________

3)图2是长期在两种条件下生长的冰叶日中花某一天的光合曲线图,表示CAM光合途径是曲线__________

 

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下图1为某地区苹果种植户发展生态果园模式图,图2是该生态系统内能量流动的示意图。据图回答下列问题:

 

1)该生态果园中的所有生物构成____________,食用菌属于生态系统成分中的____________,图1中属于第二营养级的有____________

2)果园中花天牛以果树的花和叶为食,肿腿蜂可以将卵产在花天牛幼虫的体表,吸取幼虫的营养,肿腿蜂和花天牛的种间关系是____________

3)从物质循环角度分析,碳元素在该生物群落内部以____________形式传递。

4)图2中的A代表________________________,能量从生产者传递到植食动物的效率为____________

 

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2019年诺贝尔生理学或医学奖颁给了揭示人体细胞的氧气感知通路及信号机制的科学家。下图表示氧气供应正常时,细胞内低氧诱导因子(HIF)会被蛋白酶降解;氧气供应不足时,HIF将转移到细胞核中。该项研究不仅在基础科研上极具价值,更有望为癌症等多种疾病的治疗打开思路。请据图回答下列问题:

1)正常条件下,氧气通过_________的方式进入细胞,细胞内合成HIF—1α的场所是_________

2)云南呈贡训练基地海拔20000多米,中国田径队常在此集训以提高成绩。高海拔地区氧气供应不足,运动员细胞中的HIF—1α将进入细胞核,和其他因子(ARNT)一起与EPO基因上游的调控序列结合,_________(选填促进抑制EPO基因的表达,EPO可刺激骨髓造血干细胞,使其___________________,从而提高氧气的运输能力。

3)由上述信号机制可知,干扰HIF—1α_________是治疗贫血的新思路。

4)为了进一步探究HIF—1α的作用,研究人员进行了以下实验,请分析回答。

 

注射物

肿瘤质量(g

培养9

培养21

实验鼠

实验鼠HIF—lα基因缺陷型胚胎干细胞

07

08

对照鼠

野生型胚胎干细胞

17

52

 

 

肿瘤细胞的____________将导致肿瘤附近局部供氧不足,请从打破癌细胞缺氧保护机制的角度提出治疗癌症的新思路:______________________

 

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