紫杉醇是从红豆杉属植物树皮中提取分离出来的一种代谢产物,具有显著的抗癌效果。科研人员设计如图一所示流程制备紫杉醇。为了获得大量的紫杉醇,先用植物外植体获得愈伤组织,然后在液体培养基中悬浮培养。请回答下列问题:
(1)图一中,为了防止微生物污染,过程①所用的外植体需在______________溶液中摇动几秒。过程②通常需用______________酶处理将愈伤组织分散成单个细胞。
(2)在愈伤组织悬浮培养时,细胞干重、蔗糖浓度和pH的变化如图二所示,细胞干重在12d后下降的原因有_____________ ;培养液中适量的蔗糖不仅可以为培养的细胞提供能源,还可以调节培养基的______。
(3)多倍体愈伤组织细胞产生的代谢产物量常高于二倍体。二倍体愈伤组织细胞经______________处理,会产生染色体加倍的细胞。
(4)为了培养能高效产生紫杉醇的红豆杉柴胡植株,科研人员将红豆杉的愈伤组织和柴胡的愈伤组织用酶处理后,获得有活力的原生质体,再用诱导剂______________使其融合,最后选择能够高效合成紫杉醇的杂交细胞进行培养。
(5)红豆杉的形成层在生长发育过程中并不能合成紫杉醇的根本原因是______________。
CTAB法是一种提取植物DNA的方法。CTAB是一种阳离子去污剂,能与核酸形成复合物,在高盐(>0.7mol/L NaCl)浓度下可溶,在低盐(0.1~0.5mol/L NaCl)浓度下复合物就因溶解度降低而沉淀,而大部分的蛋白质及多糖等仍溶解于溶液中。通过有机溶剂抽提,去除蛋白质等杂质后,加入异丙醇获得的沉淀为CTAB与核酸复合物,用体积分数为75%的乙醇洗涤可去除CTAB,具体流程如下,请回答下列问题:
(1)腊梅新鲜嫩叶在液氮中更易于研磨的原因______________,而且低温下各种物质不易被降解。
(2)过程①中,CTAB提取液中NaCl浓度为1.4mol/L,其目的是______________。
(3)氯仿-异戊醇,其密度均大于水,能使蛋白质变性沉淀,与水和DNA均不相溶,且对DNA影响极小。过程②中加入氯仿异戊醇离心后,DNA主要存在于A中,则A为______________(填上清液或沉淀物)。
(4)过程③加入异丙醇出现沉淀的主要原因是______________。
(5)过程④用体积分数为75%的乙醇洗涤后的沉淀物中含有RNA,为得到较为纯净的DNA,可先用一定浓度的NaCl溶液溶解沉淀物,然后加入______________酶,再重复步骤______________(填图中序号),最后在上清液中加入冷却的、体积分数为______________,可以得到纯净的DNA。
土壤盐渍化影响水稻生长发育。科研人员将水稻耐盐基因OsMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳88中,培育出了几株耐盐碱水稻新品种。其操作流程及相关限制酶识别序列和切割位点如下图,图中I~Ⅲ为限制酶的酶切位点,bar为抗除草剂基因,Kanr为卡那霉素抗性基因。请回答下列问题:
(1)催化过程①的酶是______________。过程②构建表达载体的作用是______________。过程③需要用______________处理根瘤农杆菌,使其成为感受态细胞。过程⑤中,首先诱导水稻愈伤组织经过______________过程形成胚状体或丛芽,进而发育成植株。
(2)过程①所用引物如下,为了便于耐盐基因 OsMYB56与质粒连接,则过程②使用的限制酶是 BamHⅠ和______________。
5′ CGCGGATCCATGAGAAAGGGCCCGTGG3′
5′ CGAGCTCCTATCCCCAGAGAGGTAGCGA3′
(3)质粒上的花椰菜病毒启动子含有______________识别和结合的核苷酸序列。
(4)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功,既要利用分子杂交法检测耐盐基因OsMYB56是否导入成功,又要用______________方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。
测定水样是否符合饮用水卫生标准,常用滤膜法测定大肠杆菌的数目。其大致流程是:用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上一将滤膜转移到含有伊红美蓝的培养基(EMB培养基)上培养→统计菌落数目,流程示意图如下图所示。其中,指示剂伊红美蓝可使大肠杆菌菌落呈现紫黑色。请回答下列问题:
(1)过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶,其中需要进行灭菌处理的是______________。与过滤有关的操作都要在______________旁进行,以防杂菌污染。
(2)将完成过滤之后的滤膜用无菌镊子夹起紧贴在EMB培养基上,这属于微生物培养中的 __________操作。经灼烧后的无菌镊子,需等其冷却后才能夹起滤膜,理由是______________。从功能角度分析,EMB培养基属于______________培养基。
(3)某生物兴趣小组的同学尝试按照上述方法进行测定,无菌操作下将10mL待测水样加入到90mL无菌水中,稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养基上的菌落数平均为120,紫黑色菌落数平均为40,则推测1L待测水样中的大肠杆菌数目为______________。
(4)该同学进一步思考,利用滤膜法也可能用于测定待测水样中其他微生物的数目。若要测定待测水样中酵母菌的数目,应更换上述过滤装置中的滤膜,选择孔径______________(填更大或更小)的滤膜。
科学家利用植物体细胞杂交技术获得了如图所示的“番茄马铃薯”植株。下列有关叙述正确的是( )
A.
B.图示技术涉及的原理有细胞膜的流动性、植物细胞的全能性等
C.过程③中应使用秋水仙素诱导细胞壁再生且还需要给与光照
D.过程④中配置培养基成分与动物细胞培养成分相比,需要更多的无机营养
E.过程⑤中若有利于芽的形成,需要配置生长素的含量高于细胞分裂素的含量
某中学研究性学习小组选用等质量的不同材料进行DNA的粗提取与鉴定表(表中+越多蓝色越深)。相关叙述正确的是( )
材料 | 休细胞染色体数 | 颜色 |
洋葱 | 2n= 16 | +++ |
火龙果 | 2n=22 | ++ |
白花菜 | 2n= 34 | + |
香蕉 | 3n=33 | +++++ |
A.用玻璃棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少
B.鉴定时向DNA溶液中加入二苯胺试剂摇匀后即观察
C.白花菜组色浅可能与细胞壁厚、研磨不充分有关
D.火龙果组总DNA较少可能与其含水量较高有关