癌症是困扰人类的四大疾病之一，人类不断尝试治疗癌症的新方法，请回答下列问题：
Ⅰ．单克隆抗体靶向治疗：
（1）取肝癌组织块，适用_________技术获得足量肝癌细胞用于后续实验。肝癌细胞培养过程中通常在培养液中通入95%的空气和5%的CO2，其中通入CO2目的是_______；肝癌细胞有贴壁生长现象，对肝癌细胞进行传代培养前，需用___________或胶原蛋白酶对其进行分离处理。
（2）用人肝癌细胞上的GPC-3抗原蛋白对小鼠进行注射，使小鼠产生免疫反应，制备杂交瘤细胞，将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，吸取培养孔中的____（填“上清液”或“沉淀细胞”），应用_______技术进行抗体阳性检测。经多次筛选和细胞培养，获得单克隆抗体（GC33）。
（3）临床治疗中，GC33杀伤含GPC-3的肝癌细胞效果不太理想。为提高治疗效果，研究人员用新的技术构建了一种双特异性抗体。图1表示该双特异性抗体的制备过程，图2表示其在肝癌治疗中的作用。结合图1、图2的信息，双特异性抗体在肝癌治疗中的作用是识别________（填“GPC-3”“CD3”或“GPC-3和CD3”），将肝癌细胞和T淋巴细胞紧密接近，有利于T淋巴细胞特异性地杀伤肝癌细胞，促使____________吞噬肝癌细胞。
Ⅱ．CAR-T疗法：
（4）技术人员通过基因工程技术，将T细胞激活并能表达定位导航装置CAR （肿瘤嵌合抗原受体），即CAR-T细胞。CAR-T细胞问输患者体内，专门识别患者体内肿瘤细胞，激活免段系统，高效地杀灭肿瘤细胞，从而达到治疗恶性肿瘤的目的。和传统治疗癌症的放疗和化疗方法相比，CAR-T疗法的优点有_____________（填序号）。
A．疗效高 B．特异性强 C．副反应小 D．操作复杂
流行性乙型脑炎病毒（JEV）是一种 RNA 病毒，进入人体后经血液循环到达脑部而引起炎症。目前应对这类感染性疾病最好的方式仍然是接种疫苗，研究人员经过不懈努力已开发了三代疫苗，制作原理和使用特点如图所示。请回答下列问题：
（1）图中过程①表示____________。
（2）获得重组大肠杆菌的步骤：获取目的基因→_____→重组DNA分子导入大肠杆菌→筛选成功导入目的基因的大肠杆菌。
（3）JEV病毒的抗原结构能激活相应的免疫系统，JEV疫苗制备过程中，疫苗Ⅰ的制作通常需要对JEV病毒进行灭活或减毒处理，这一处理的关键是保持病毒的_______：在疫苗Ⅱ和疫苗Ⅲ两种情况中，直接合成抗原的细胞分别是____和_____，合成的抗原结构_________（填“完全相同”“不完全相同”或“完全不同”）。
（4）关于疫苗Ⅲ的叙述，正确的有____________（填序号）。
A．分子较小，结构较稳定 B．能通过PCR技术增加生产量
C．能激活机体产生特异性免疫 D．疫苗Ⅲ已广泛用于人工免疫
（5）图中利用基因工程制备的疫苗Ⅱ、疫苗Ⅲ， 均需要大肠杆菌参与，请尝试说出选择大药杆作为重组质粒受体的原因_____________________（答出两点）。
黑藻是一种常见的沉水植物，其叶片小而薄，叶肉细胞内的叶绿体大而清晰，液泡无色。某同学用黑藻作为实验材料尝试进行以下实验：
实验Ⅰ: 观察叶肉细胞的质壁分离和复原现象，实验步骤如下图，请回答下列问题：
（1）步骤A是制作黑藻叶片临时装片，先在载玻片上滴加_____ ，把黑藻叶片放入并履平，然后盖上盖玻片，进行观察。
（2）步骤B用显微镜观察的主要目的是_______，步骤C中，从盖玻片的一侧滴入蔗糖溶液，另一侧用吸水纸吸引，___________，以保证黑藻叶片完全浸润在蔗糖溶液中。
（3）步骤器D观察到原生质层的颜色呈______。步骤E滴加清水后，在步骤F观察到多数黑藻细胞发生质壁分离复原现象，该过程________（填“有”或“无”）水分子扩散出细胞。
实验Ⅱ：用新鲜黑藻进行“叶绿体中色素的提取和分离”的实验，下图甲～丁表示实验的几个主要投作步骤，请回答下列同题：
（4）实验操作步骤的先后顺序是_________。 （用序号和箭头表示）
（5）步骤乙操作中需加人的药品和试剂有_________。
（6）步骤丙中，滤纸条上出现四条色素带，距离滤液细线最近的色素带的颜色是_________。
图1为某高等植物叶肉细胞内某结构剖面示意图及其所发生的部分生化反应，其中e+表示电子；图2为该叶肉细胞中部分代谢途径示意图。请回答下列问题：
（1）图1所示膜的名称为________，膜中的生化反应伴随着能量转化，其能量形式依次为______。
（2）据图1分析，蛋白M的作用有_____________、________________。
（3）据图2分析，在光合作用过程中，CO2与RuBP（五碳化合物）结合的直接产物是磷酸丙糖（TP）， TP 的去向主要有三个。淀粉是暂时存储的光合作用产物，其合成场所应该在叶绿体的_____________中。淀粉运出叶绿体时先水解成TP 或______，后者通过叶绿体膜上的载体运送到细胞质中，合成由______糖构成的蔗糖，运出叶肉细胞。
下图表示分泌蛋白合成，加工、运输、分泌的途径，请回答下列问题：
（1）该生理过程发生在_____（填“原核”或“真核”）细胞中。图中具有单层膜的细胞结构有_____（填序号）
（2）图中构成生物膜系统的细胞结构有_____（填序号）， 构成膜结构的基本骨架是_____。
（3）图中的分泌蛋白最初在______（填序号）中合成，合成后通过_____运输到④中进一步修饰加工，该过程体现了细胞内各种生物膜在____上紧靠联系。
（4）若用吡罗红和甲基绿混合染液对该细胞染色，在显微镜下看到细胞核和细胞质分别被染成_________。
从蓝光到紫外线都能使绿色荧光蛋白（GFP）激发，发出绿色萤光。研究人员将某病毒的外壳蛋白（L1）基因与GFP基因连接，获得了L1-GFP融合基因，并将其插入质粒PO，构建了重组质粒P1，。下图为P1部分结构和限制酶酶切位点的示意图，相关叙述正确的是（ ）
A.将L1-GFP融合基因插入质粒PO时，使用了E1、E2和E4三种限制性核酸内切酶
B.可借助基因工程、核移植技术、早期胚胎培养及胚胎移植技术获得转基因的克隆牛
C.可采用抗原-抗体杂交技术检测该融合基因是否存在于转基因牛的不同组织细胞中
D.若在某转基因牛皮肤细胞中观察到绿色荧光，则说明L1基因在该细胞中完成表达
