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凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。科研人员在实验室中利用初...

凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。科研人员在实验室中利用初步获得的猪红细胞液体进行血红蛋白(相对分子质量约为64000)的提取、分离和鉴定实验,请回答下列问题:

1)将初步获得的红细胞洗涤好后加入蒸馏水与_____,经搅拌、离心、分层后分出血红蛋白溶液,再装入_____12小时,即完成粗分离。

2)粗分离的血红蛋白溶液中含有一些微蛋白(相对分子质量约为11800),需要使用______________法进行血红蛋白的纯化,这两种蛋白质通过凝胶时,_____(填“血红蛋白”或“微蛋白”)移动速度较快,原因是________________________

3)在纯化洗脱血红蛋白时,需要加入_____(填“磷酸缓冲液”或“生理盐水”),理由是___________________

4)最后要利用__________法鉴定血红蛋白的纯度

 

甲苯 透析袋 凝胶色谱法 血红蛋白 血红蛋白相对分子质量大,在凝胶颗粒外部移动,距离较短,移动速度快 磷酸缓冲液 让血红蛋白处在与体内环境相同的PH范围内,维持其结构和功能 电泳 【解析】 血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步,包括:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液,即样品的处理;再经过透析去除分子量较小的杂质,即样品的粗分离;然后通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去,即样品的纯化;最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。 (1)血红蛋白样品处理及粗分离时,为了释放血红蛋白需要加入蒸馏水和40%甲苯,细胞破裂释放血红蛋白,然后离心分层出血红蛋白溶液,再装入透析袋中。 (2)常用凝胶色谱法纯化血红蛋白,凝胶实际上是一些微小的多孔球体,相对分子量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢;相对分子量较大的蛋白质无法进入凝胶内部通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快。比较分子量,血红蛋白分子量大于微蛋白,所以血红蛋白移动速度较快。 (3)洗脱时需要加入磷酸缓冲液,主要是保持体外溶液的pH与体内环境中的pH基本一致,让血红蛋白处在稳定的pH范围内,维持其正常结构和功能。 (4)为鉴定血红蛋白的纯度,要利用电泳实现样品中各种分子的分离,常用的两种电泳方法是:琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。
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水蜜桃具有美肤、清胃、润肺、祛痰等功能,其可以制作成水蜜桃汁、水蜜桃酒和水蜜桃醋等产品,深受大众喜爱。某企业对水蜜桃进行相关的制作实验,如图所示:

回答下列问题:

1)打开阀2,使浑浊的水蜜桃汁与黑曲霉提取液混合后可得到较多的澄清水蜜桃汁的原因是黑曲霉提取液中含有大量的果胶酶,该酶将果胶分解形成_____________,从而使浑浊的果汁变得澄清。

2)固定化柱2中加入常用_____法固定的酵母菌;制备固定化酵母细胞的实验操作中,要配制氯化钙溶液,其作用是___________________________________

3)固定化果胶酶更适合使用_________________________________,理由是 _____________________________________

4)固定化柱3中需加入的菌种是_____。该菌种在氧气充足、_____情况下,将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸。

 

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下面左图表示某胰岛A细胞,膜外颗粒为胰高血糖素;右图是该细胞在胰高血糖素分泌前几种生物膜面积的示意图,请据图回答:

1)此细胞与高等植物细胞相比,一定不含有的细胞结构___________________________。与原核细胞相比,都含有的细胞器__________,分离这些细胞器常用的方法是___________

2)抗体的化学本质是____________。抗体的合成场所是_____________

3)在胰高血糖素分泌的过程中要消耗能量,提供能量的细胞器是________。该细胞用__________________染料染色。

4)生物膜系统由细胞膜和________________等构成。该细胞在抗体分泌前后几种生物膜面积将会发生改变,由此可说明,生物膜的结构特点是________________________

 

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获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵,无菌技术在生产、生活和科研实践中有着广泛的应用。有关无菌技术的叙述错误的是(  )

A.对于不耐高温的液体,如饮用前的鲜牛奶应用巴氏消毒法进行处理

B.耐高温且需要干燥的物品应用干热灭菌处理

C.对培养基灭菌时应用高压蒸汽灭菌法

D.使用后的培养基可以直接丢弃

 

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萃取法是将粉碎、干燥的植物原料用有机溶剂浸泡,使芳香油溶解在有机溶剂中,蒸发出某种物质,就可以得到纯净的植物芳香油。蒸发出的物质是

A. 有机溶剂 B. 芳香油 C. 有机溶剂中杂质 D. 芳香油中杂质

 

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生物产品的分离、纯化是现代生物技术中一种常见的技术。下列关于物质提取、纯化原理的叙述中,不正确的是(  )

A.采用凝胶色谱法分离果胶酶的原理是蛋白质分子的相对分子质量不同,在色谱柱中的移动速度不同

B.使用透析法可以去除样品中相对分子质量较大的杂质

C.电泳法是利用样品中各种分子带电性质和数量以及样品分子大小不同,产生的迁移速度不同而实现样品中各种分子的分离

D.离心法分离蛋白质的依据是不同大小的分子离心时沉降速度不同

 

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