Question

植物基因工程在作物育种中有着巨大的潜力。为了改善水稻的品质，科学家采用农杆菌转化法将抗白叶枯病基因成功导入水稻细胞，得到转基因植株。回答下列问题：

（1）用农杆菌侵染时，为了提高转化的效率，可以优先选用水稻____（填创伤的 或完好的）叶片与含重组质粒的农杆菌共同培养。抗白叶枯病基因之所以能整合到水稻基因组，原因是两者的DNA都为____结构。

（2）若要检测水稻中该基因是否成功表达，可用____作为特异探针。用该转基因水稻的某一植株与一株非转基因植株杂交，发现子代中含抗病蛋白个体数与不含抗病蛋白个体数之比为1∶1，则说明抗病蛋白基因已经整合到____（A．线粒体基因组 B．核基因组 C．叶绿体基因组）中。

（3）在0．5-0．6mol/L甘露醇溶液形成的____环境下用酶溶液处理水稻的叶肉细胞，获得含有原生质体的混合物，过滤未解离的组织后，还需对滤液进行____和洗涤处理，获得纯化的原生质体。可利用光学显微镜直接观察该原生质体的____现象，检测其活力。

（4）该转基因水稻受到其它病毒感染而减产，为获得脱毒苗，最好选用它的____作为外植体进行组织培养。

Answer

创伤的 双螺旋 抗白叶枯病蛋白的抗体 B 较高渗透压 离心 胞质环流 茎尖（愈伤组织/芽尖）

【解析】

基因工程又称基因拼接技术或重组技术，是以基因为操作对象，借助基因重组原理，在DNA分子水平上按照人类需求制作基因产物的技术。其基本过程为获取目的基因→构建重组基因序列→导入受体细胞→检测目的基因的表达。

（1）由于叶片伤口处的细胞会释放大量酚类物质，会吸引农杆菌移向这些细胞，故用农杆菌侵染时，为了提高转化效率，可以优先选用水稻创伤的叶片与含重组质粒的农杆菌共同培养；抗白叶枯病基因之所以能整合到水稻基因组，原因是两者的DNA都为双螺旋结构；

（2）要检测水稻中基因是否成功表达，则可以采用抗白叶枯病蛋白的抗体作为特异探针；用该转基因水稻的某一植株与一株非转基因植株杂交，发现子代中含抗病蛋白个体数与不含抗病蛋白个体数之比为1∶1，遗传符合分离定律，说明抗病蛋白基因已经整合到核基因组中，故选B；

（3）0．5-0．6mol/L甘露醇溶液能够形成较高渗透压的环境；用酶溶液处理水稻的叶肉细胞，获得含有原生质体的混合物，过滤未解离的组织后，还需对滤液进行离心和洗涤；可以利用光学显微镜直接观察原生质体的胞质环流现象检测其活力；

（4）由于茎尖等分生组织中几乎不含病毒，故为获得脱毒苗，最好选用其茎尖作为外植体进行组织培养。