Question

（一）酵母菌是常用的工程菌，与我们的生活关联密切，回答相关的生物技术问题。

（1）用葡萄酿制果酒时，不可过度清洗葡萄， 避免葡萄表皮上的___大量流失。葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约___的空间， 其目的是___________。

（2）若利用同一个装置，继续生产果醋，需要___温度，___空气。 

（3）普通酵母菌不耐高糖，为获得耐高糖和耐酸特性的优良酵母菌菌种， 科学工作者对野生酵母菌进行诱变及筛选，过程如下：

步骤1 野生菌培养一段时间后，接受紫外线照射进行诱变处理。

步骤2 制备选择培养基：在基本培养基的基础上，注意添加高浓度蔗糖和调低pH，加琼脂后灭菌，制成固体平板。 

步骤3 将诱变处理后的菌液通过__法接种， 目的是获得单一的菌落，便与计数。　

步骤4 根据_____选出突变菌。 

（4）植物秸秆的主要成分为木质素、纤维素和半纤维素，但是酵母菌却无法直接利用，原因是___________。

（二）柠檬油是植物芳香油中的一种，它是一种广谱性的杀虫剂，可杀死蚊子、苍蝇、蟑螂等传染疾病的害虫，以及危害粮食、蔬菜的常见害虫，包括幼虫、蛹等，是一种绿色杀虫剂。

（1）柠檬油的挥发性________，易溶于________，比重比较轻。

（2）提取柠檬油常用的原料是柠檬花与柠檬果皮，嫩的花朵在蒸馏过程中，精油易被水蒸气分子破坏，所以可采用________法。柠檬果皮中精油的提取适宜采用________法。

（3）从果皮中提取精油的步骤为：

其中A是_____溶液，用来破坏细胞结构； B是相当于柠檬皮质量的0．25%的小苏打和5%的硫酸钠，目的是_______；C过程是过滤，目的是______________。

（4）某公司为应对新冠疫情，研制出了一种柠檬精油室内空气消毒片，使用方法类似于电蚊香片。为检验效果，某同学在消毒前后，统计空气中细菌和真菌数量。统计的平均菌落数往往比实际活菌数低， 原因是_____________________________。

Answer

（野生型）酵母菌 1/3 防止发酵旺盛时汁液溢出来（爆瓶）; 有利于（提供）发酵初期酵母菌有氧呼吸繁殖所需氧气，增加菌种数 提高（或30—35度） 持续（不断）通入（无菌） 稀释涂布平板 是否形成优势菌落（能在选择培养基上生长或获得单一优势菌落） 缺乏相应分解酶系(或缺乏分解木质素、纤维素和半纤维素的酶、缺少或缺失分解相关物质的酶) 强 有机溶剂 萃取 压榨 石灰水 使精油易与水分离 除去固体物和残渣 当两个或多个活菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落

【解析】

1、微生物的常用接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可用于微生物计数。
2、植物有效成分提取常用的方法有蒸馏法、压榨法和萃取法，可根据产品的性质和原料特点选取不同的提取方法。
3、由于柠檬油（橘皮油）存在于柠檬皮（橘皮）中，采用水蒸气蒸馏法会由于温度过高使有效成分发生部分分解，水中蒸馏又会出现原料焦糊问题，因此常采用压榨法进行提取。
4、压榨法提取橘皮油（柠檬油）的实验流程是：石灰水浸泡→漂洗→压榨→过滤→静置→再次过滤→橘皮油（柠檬油）。

（一）（1）为了避免葡萄表皮上的酵母菌大量流失，在用葡萄酿制果酒时，不可过度清洗葡萄。葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，目的是防止发酵旺盛时汁液溢出，同时有利于提供发酵初期酵母菌有氧呼吸所需氧气，为酵母菌的繁殖提供大量能量，以增加菌种数。

（2）果酒制作需要无氧环境，果醋制作需要有氧环境，果酒制作的适宜温度是18~25°C，果醋制作需要的适宜温度是30~35°C，所以若利用同一个装置，继续生产果醋，需要提高温度，并持续（不断）通入（无菌）空气。

（3）因为实验目的是获得单一的菌落，并计数，所以接种方法应为稀释涂布平板法。培养基中添加了高浓度蔗糖（葡萄糖）和调低pH，耐高糖和耐酸特性的优良酵母菌菌种会在此培养基上形成优势菌落，所以可根据是否形成优势菌落（能在选择培养基上生长或获得单一优势菌落）选出突变菌。

（4）酵母菌缺乏分解木质素、纤维素和半纤维素的酶，因此不能直接利用植物秸秆（主要成分为木质素、纤维素和半纤维素）。

（二）（1）柠檬油的挥发性强，易溶于有机溶剂。

（2）提取柠檬油常见的原料是柠檬花与柠檬果皮，嫩的花朵在蒸馏过程中，精油易被水蒸气分子破坏，所以一般不用蒸馏法提取柠檬油，利用其易溶于有机溶剂的特点，可采用萃取法提取。柠檬果皮精油的提取适宜采用压榨法，此种方法是通过机械压力将柠檬油从混合物中分离出来。

（3）分析题图可知，A是石灰水，用石灰水浸泡的目的是破坏细胞结构，分解果胶，防止压榨时滑脱，提高出油率。为了便于柠檬油与水分离，常加入相当于柠檬果皮质量0.25%的NaHCO3和5%的 Na2SO4溶液，并将PH调至7～8。C过程是过滤，该过滤过程用普通布袋，目的是除去压榨液中的固体物和残渣。

（4）由于当两个或多个活菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以统计的平均菌落数往往比实际活菌数低。