Question

酵母菌是发酵工程常用的微生物，在日常生活中也有广泛应用。某同学为了研究酵母菌种群数量的变化规律，进行了下图所示的实验（密度单位：×10²个/mL）。回答下列问题：

（1）取样前，需要对培养液轻轻振荡，目的是让酵母菌分布______，用血球计数板制片时，应先将__________放在计数室上，再用吸管吸取培养液滴在其边缘。

（2）每天对每个样品可计数三次，再取其___________（填“中间值”或“平均值”），如果需计数活菌数，可用台酚蓝染液进行染色，被染色的是_____（填“活”或“死”）的酵母菌。

（3）下图中，A图是一块血球计数板正面示意图，其中的0.1mm表示______________(填“凹槽”或“计数室”)深度。B图是该同学将试管中培养液摇匀后取样并制片，在显微镜下观察到的现象，为了能便于计数，则应采取的措施是___________（填“少加点培养液”或“对培养液进行稀释”）。

（4）C图是该同学观察到的计数室中某中方格酵母菌分布状况，则该中方格中酵母菌的计数为___________个（图中小圆圈表示酵母菌）。

Answer

均匀 盖玻片 平均值 死 计数室 对培养液进行稀释 18

【解析】

采用抽样检测法使用血球计数板对酵母菌进行计数，在计数时应注意以下几方面：

1、每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数板计数酵母菌个数，并作记录，连续观察7天。

2、从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡几下，这样使酵母菌分布均匀，防止酵母凝聚沉淀，提高计数的代表性和准确性，求得的培养液中的酵母菌数量误差小。

3、如果一个小方格内酵母菌过多难以数清，应当对培养液进行稀释，以便于酵母菌的计数。

4、对于压在方格界线上的酵母菌，应当计数同侧相邻两边上的菌体数，一般可采取数上线不数下线，数左线不数右线的原则处理，另两边不计数。

5、计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算，对每个样品可计数三次，再取其平均值。计数时应不时地调节焦距，才能观察到不同深度的菌体。按公式计算每mL（或10mL）菌液中所含的酵母菌个数。

（1）取样前要轻轻振荡试管，使酵母菌在培养液中均匀分布。用血球计数板制片时，应先轻盖盖玻片，后将培养液滴在计数板上，防止气泡产生。

（2）每天对每个样品可计数三次，再取其平均值，可减小实验误差；由于细胞膜具有选择透过性，实验中被台盼蓝溶液染成蓝色的酵母菌为死细胞，活细胞不会被染上颜色。

（3）A图中的0．1mm表示计数室的深度，B图中酵母菌的数量过多，为了能便于计数，应对培养液进行稀释。

（4）依据分析中的计数原则（数上线不数下线，数左线不数右线），该中方格中酵母菌的计数为18个。