Question

下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌的培养基配方，请根据表格内容和所学知识回答下列问题。

成分	含量
蛋白胨	10.0g
乳糖	5.0g
蔗糖	5.0g
K2HPO4	2.0g
显色剂（伊红·美蓝）	0.2g
琼脂	12.0g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL

（1）在微生物的实验室培养中，获得纯净大肠杆菌菌群的关键是防止____________，因此需对培养基和培养皿进行____________；操作者的双手需要进行清洗和____________。

（2）根据培养基成分，上述培养基属于____________（填“选择”或“鉴别”）培养基，用该培养基培养大肠杆菌，常用的接种方法___________，经培养可以分离得到若干个由一个细胞繁殖而来的、肉眼可见的子细胞群体，称为_____________。

（3）若利用该培养基从土壤中获得能分解尿素的细菌，需将培养基的某成分进行替换，即________。在基础培养基上滴加酚红指示剂可以鉴定其上细菌能否分解尿素，其原理是_____________。

（4）取1g土壤，按下图稀释后，在3个平板上分别接入0.1mL稀释液并培养后，3个平板上的菌落数分别是52、50和48。据此可计算出每克土样中的活菌数为____________个，该数值与活菌的实际数目相比偏低，原因是_____________。

 

Answer

外来杂菌入侵 灭菌处理 消毒 鉴别 平板划线法、稀释涂布平板法 菌落 将蛋白胨替换成尿素 分解尿素的细菌能将尿素分解为氨、使培养基碱性增强，酚酞指示剂变红 5.0×107 因为两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落

【解析】

1、培养基按功能分：
2、微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）微生物培养时，关键是防止外来杂菌的污染；对于培养基和培养皿需要进行灭菌处理，人的双手需要消毒处理。

（2）该培养基中含有显色剂（伊红•美蓝），可用于大肠杆菌的鉴定，应该属于鉴别培养基。接种微生物常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，称为菌落。

（3）分离能分解尿素的细菌时应该以尿素为唯一氮源，因此需要将蛋白胨换成尿素；鉴定分解尿素的细菌，需要使用酚红指示剂，尿素分解菌产生的脲酶能够将尿素分解为氨，氨能够使酚红指示剂呈红色。

（4）取1g土壤，按如图稀释后，在三个平板上分别接入0.1ml稀释液后，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别是52，50和48．据此可计算出每克土样中的活菌数为（52+50+48）÷3×106=5.0×107个；由于两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此该数值与活菌的实际数目相比偏低。