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农业科学研究所运用现代工程技术手段对某高产双子叶农作物进行改良,获得了高产、抗虫...

农业科学研究所运用现代工程技术手段对某高产双子叶农作物进行改良,获得了高产、抗虫的作物新品种,基本操作流程如下图。请据图回答:

请回答问题:

1)如果用某抗虫真核生物的mRNA反转录产生的DNA片段,与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群就叫该抗虫生物的_______;获得的DNA片段与该抗虫生物细胞中的抗虫基因碱基序列______(填相同不同)。

2)将抗虫基因导入双子叶植物外植体前,首先要经过步骤①构建基因表达载体。下图甲、乙分别表示抗虫基因、载体DNA及相关的酶切位点。请回答:

Ⅰ.为防止抗虫基因的自身环化及与载体DNA的随意连接,最好使用___________酶切割抗虫基因和载体DNA

Ⅱ.不能用Sma Ⅰ进行切割的原因是____________

Ⅲ.构建完成的基因表达载体应含有位于抗虫基因首端的启动子及位于尾端的______,其中启动子是______的识别和结合部位。

3)过程②常用的方法是_________;若要将抗虫基因插入到外植体细胞的染色体DNA上并稳定表达,则应将抗虫基因插入到该载体DNA___________部位。

4)过程③的核心步骤为_________________,该过程的理论依据是____________

 

cDNA文库(或部分基因文库) 不同 PstⅠ和EcoRⅠ 会破坏载体DNA中的抗生素抗性基因及外源DNA中的抗虫基因 终止子 RNA聚合酶 农杆菌转化法 T-DNA 脱分化和再分化 (植物)细胞的全能性 【解析】 分析题图:①表示基因表达载体的构建;②表示将目的基因导入受体细胞;③表示植物组织培养过程。 分析甲图:外源DNA分子和质粒中都含有三种限制酶的切割位点,其中SamⅠ的切割位点位于目的基因和抗生素抗性基因上,因此构建基因表达载体时,不能用该酶切割。 (1)以mRNA为模板,通过反转录产生的DNA片段,与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群就叫该抗虫生物的cDNA文库(或部分基因文库);获得的DNA片段不含内含子、启动子等结构,与该抗虫生物细胞中的抗虫基因碱基序列不同。 (2)Ⅰ-Ⅱ外源DNA分子和质粒中都含有三种限制酶的切割位点,其中SamⅠ的切割位点位于目的基因和抗生素抗性基因上,因此构建基因表达载体时,不能用该酶切割;为防止抗虫基因的自身环化及与载体DNA的随意连接,最好使用PstⅠ和EcoRⅠ酶切割抗虫基因和载体DNA; Ⅲ构建完成的基因表达载体应含有位于抗虫基因首端的启动子及位于尾端的终止子,其中启动子是RNA聚合酶的识别和结合部位。 (3)②表示将目的基因导入双子叶植物细胞,常用农杆菌转化法;若要将抗虫基因插入到外植体细胞的染色体DNA上并稳定表达,则应将抗虫基因插入到该载体DNA的T-DNA部位(Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上)。 (4)③过程需要采用植物组织培养技术,该技术的核心步骤为脱分化和再分化,理论依据是(植物)细胞的全能性。
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考点分析:
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酵母菌在工业生产中具有重要的用途,常用YPD进行培养。YPD又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培养基,其配方为1%酵母膏、2%蛋白胨、2%葡萄糖。酵母膏是指采用新鲜酵母为原料,经酶解自溶、分离过滤、浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。请回答:

1YPD中为酵母菌提供氮源的是___________,制备好的YPD常用___________法进行灭菌,平板冷凝后,要将平板___________

2)该培养基加入琼脂后可以制成固体培养基,若要以该固体培养基培养酵母菌并对菌落进行计数,接种时,应采用的方法是___________。通过统计平板上的菌落数,就能推测样品中大约含有的活菌数,原因是____________

3)在对酵母菌的扩大培养过程中,将发酵液稀释107倍后,每个平板使用01毫升进行接种,理论上每个平板上的菌落个数为___________,可认为发酵液达到每毫升6×109个活细胞的预期密度。

4)酵母菌用于酿酒时,发酵初期通入无菌空气,后期密闭,密闭培养过程中,由于发酵液________,因此其他微生物很难生存。酿制过程中,密闭不严会使酒变酸,原因是____________

 

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酶是一类具有催化功能的生物大分子,其功能具有专一性,如麦芽糖酶能催化麦芽糖水解成单糖,但不能使蔗糖水解。某同学进行了如下操作:取一只U形管,在其底部中央放置了不允许二糖通过的半透膜(允许水分子通过,单糖能否通过未知)。现将U形管半透膜左侧和右侧分别倒入等量的质量分数相等的蔗糖溶液和麦芽糖溶液。一段时间后,在U形管的两侧分别滴入等的麦芽糖酶溶液,将该装置置于适宜温度下静置一段时间。请分析回答:

1)在加入麦芽糖酶溶液前,U形管内半透膜两侧的溶液液面高度_______(填“相等”或“不相等”)

2)请预测加入麦芽糖酶溶液后,U形管右侧的液面可能发生的变化,并说明每种变化的出现需满足的条件:__________

3)若U形管右侧液面高于左侧且静止不动,则右侧溶液单位体积溶质微粒的数目___________(填“大于”或“小于”或“等于”)左侧。

 

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下图是胰岛B细胞分泌胰岛素过程的示意图。请据图回答:

1)分离图中各种细胞器常用的方法是_________;科学家研究细胞中胰岛素的合成、运输及分泌路径实验中,采用的研究方法是_________

2)组成胰岛素的单体脱水缩合,发生在图中的___________(填序号)上;胰岛素的合成和分泌过程中,依次经过的具膜结构有___________(填序号),所需能量主要来自___________(填序号)。

3)胰岛素可以作用于全身大部分细胞,而促甲状腺激素只能作用于甲状腺细胞,原因是___________

4)细胞内发达的膜结构使真核细胞区室化,这对于细胞代谢活动的意义是______

 

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下列关于DNA粗提取与鉴定实验的叙述,正确的是(   

A.新鲜猪血、菜花等材料均可用于DNA的粗提取

B.研磨洋葱时加入洗涤剂的作用是瓦解细胞壁,有利于细胞破裂

C.DNA95%的冷酒精和2moL/LNaCl溶液中溶解度较大

D.过滤后的研磨液中可加入木瓜蛋白酶以纯化DNA

 

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下列关于生物技术结果检测、鉴定方法的叙述,错误的是(   

A.果汁发酵是否产生酒精,可在酸性条件下使用重铬酸钾检验

B.果醋制作过程中,可以通过品尝或用pH试纸检验是否产生醋酸

C.泡菜制作过程中,测定亚硝酸盐的含量可以将显色后的样品与标准显色液进行目测比较

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